[发明专利]一种用于海水鱼类肌肉干细胞快速分化的分化诱导培养基在审
| 申请号: | 202211615748.3 | 申请日: | 2022-12-15 |
| 公开(公告)号: | CN115820549A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
| 发明(设计)人: | 郭华荣;薛霆 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
| 主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
| 代理公司: | 北京识然知识产权代理事务所(普通合伙) 11975 | 代理人: | 曾庆国 |
| 地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 海水 鱼类 肌肉 干细胞 快速 分化 诱导 培养基 | ||
1.一种用于海水鱼类肌肉干细胞体外分化的分化诱导培养基,其特征在于,所述的分化培养基是添加有2%间充质干细胞专用胎牛血清、维生素C、维生素D和胰岛素的L-15基础培养基。
2.如权利要求1所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的维生素C浓度为100-400μmol/L。
3.如权利要求1所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的维生素D浓度为50-300nmol/L。
4.如权利要求1所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的胰岛素浓度为0.1-10μg/mL。
5.如权利要求1所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的分化诱导培养基中还添加有抗生素。
6.如权利要求5所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的添加有抗生素,是添加1.0×105IU/L青霉素钠和100mg/L链霉素。
7.如权利要求1所述的分化诱导培养基,其特征在于,所述的分化诱导培养基是添加有终浓度为2%间充质干细胞专用胎牛血清、终浓度为200μmol/L的维生素C、终浓度为100nmol/L的维生素D和终浓度为10μg/mL的胰岛素的L-15基础培养基。
8.权利要求1-7任一项所述的分化诱导培养基在诱导海水鱼类肌肉干细胞分化中的应用。
9.一种诱导海水鱼类肌肉干细胞快速分化的方法,其特征在于,所述的方法使用权利要求1-7任一项所述的分化诱导培养基来培养海水鱼类肌肉干细胞。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的方法包括如下的步骤:
S1:分离得到海水鱼类肌肉干细胞;
S2:将海水鱼类肌肉干细胞接种到细胞培养板中,于鱼类肌肉干细胞培养基中培养,将海水鱼类肌肉干细胞培养至密度达到90%以上;
S3:吸去海水鱼类肌肉干细胞培养基,用PBS润洗一遍,加入所述的分化诱导培养基,继续培养,诱导海水鱼类肌肉干细胞的分化;
S4:每隔2天,用所述的分化诱导培养基对海水鱼类肌肉干细胞进行换液,继续培养,直至海水鱼类肌肉干细胞分化为成肌细胞,并相互融合形成肌管以及分化形成肌纤维。
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