[发明专利]玉米ZmRAFS基因用于提高玉米耐储藏能力的应用

说明书

本发明公开了玉米ZmRAFS基因用于提高玉米耐储藏能力的应用。本发明通过在玉米中超表达ZmRAFS基因，提高了玉米的耐储藏能力。

技术领域

本发明涉及玉米ZmRAFS基因的新应用，具体涉及玉米ZmRAFS基因用于提高了玉米耐储藏能力的应用。

背景技术

发明人前期研究成果公开了在拟南芥中过量表达玉米ZmRAFS基因降低了拟南芥种子的耐储藏能力(Li,T.,et al.,Raffinose synthase enhances drought tolerancethrough raffinose synthesis or galactinol hydrolysis in maize and Arabidopsisplants.Journal of Biological Chemistry.2020.295:8064-8077)。

发明内容

发明人研究发现玉米ZmRAFS基因(GRMZM2G150906)在玉米中过量表达，可提高玉米种子的耐储藏能力。

基于此，本发明提供了玉米ZmRAFS基因用于促进玉米种子耐储藏的应用，所述玉米ZmRAFS基因序列如SEQ ID NO:1所示，或者，所述玉米ZmRAFS基因编码的蛋白序列如SEQID NO:2所示。具体方案中，通过在玉米中超表达玉米ZmRAFS基因提高了玉米的耐储藏能力。

附图说明

图1为本发明实施例玉米超表达载体示意图；其中：pUbi:玉米Ubiquitin启动子；NOS:终止子；p35S:花椰菜花叶病毒35S启动子；Bar:抗除草剂基因；Tvsp:终止子；HindIII,EcoRV:限制性酶切位点。箭头所示F1,R1,F2,R2,F3,R3为图2说明中PCR引物位置。

图2为本发明实施例超表达ZmRAFS基因后玉米株系叶片ZmRAFS基因表达量提高；(A)玉米超表达ZmRAFS转基因株系的PCR鉴定；Marker:DNA分子量；Control:水做负对照；Zong31:玉米综31自交系基因组DNA；Plasmid:质粒DNA,作正对照；pTF101.1-ZmRAFS(1-9):超表达ZmRAFS的9个独立转化事件；(B)玉米超表达ZmRAFS转基因株系叶片ZmRAFS mRNA表达水平高于对照；Zong31:玉米综31自交系；ZmRAFS#1,2,3为超表达ZmRAFS基因的3个株系(综31背景)；ZmGAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因mRNA表达水平，作内参；(C)玉米超表达ZmRAFS转基因株系叶片ZmRAFS蛋白表达水平高于对照；Zong31:玉米综31自交系；ZmRAFS#1,2,3为超表达ZmRAFS基因的3个株系(综31背景)；ZmGAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶蛋白，作内参。

图3为本发明实施例超表达ZmRAFS基因提高提高玉米种子耐储藏能力(耐老化能力)相关结果；(A)老化处理的ZmRAFS过表达株系与综31自交系种子萌发表型，标尺＝5cm；(B)老化处理的ZmRAFS过表达株系及其综31自交系种子萌发速率比较；每个株系3个生物学重复，每个重复50粒种子；(C～D)老化处理后ZmRAFS过表达玉米株系及其综31自交系种子吸胀120h后胚芽(C)、胚根(D)长度比较；Zong31：玉米综31自交系；ZmRAFS(#1,#2,#3)：ZmRAFS转基因株系；数据表示均值±标准误，每个灰点代表1个生物学重复，每个株系3个生物学重复；不同的小写字母代表差异显著(Duncan test，P0.05)。AA3，老化处理3天；RH，相对湿度。

具体实施方式

除非有特殊说明，本文中的科学与技术术语及方法根据相关领域普通技术人员的认识理解或采用相关领域技术人员公知方法实现。

下面结合附图和具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细地说明。如无特殊说明，以下实施例所用材料或试剂均为市售产品。

实施例：