[发明专利]肝脏c-kit阳性细胞在制备治疗肝病的药物中的应用

说明书

本发明提供了肝脏c‑kit阳性细胞在制备治疗肝病的药物中的应用。肝脏c‑kit阳性细胞的分离方法简单易行，获取方便。肝脏c‑kit阳性细胞高表达肝脏代谢相关分子并低表达炎症分子，回输后可减轻肝脏脂质沉积，降低肝脏炎症，促进肝细胞增殖。肝脏c‑kit阳性细胞对非酒精性肝病具有较好的治疗作用，为临床治疗非酒精性肝病‑肝细胞癌‑终末期肝病提供了新的有效方法。

技术领域

本发明属于细胞生物学技术领域，涉及肝脏c-kit阳性细胞在制备治疗肝病的药物中的应用。

背景技术

非酒精性肝病是肝细胞内脂肪过度沉积引起的慢性肝脏疾病，渐进性发展最终可形成肝硬化，甚至诱发肝细胞癌和终末期肝病，严重威胁人们的生命健康。目前还没有药物被批准用于治疗非酒精性肝病，但有效的治疗可改善肝脏脂肪变性、肝脂肪堆积、炎症等。因此，探索有效的非酒精性脂肪肝治疗方法具有重要的意义。

目前，国内外很多学者研究细胞治疗非酒精性肝病主要聚焦在肝细胞上。肝血窦内皮细胞(LSECs)作为肝脏最大的非实质细胞亚群，是肝脏组织稳态维持和损伤修复调控的重要效应细胞，因此以LSECs为靶点有望为非酒精性肝病的治疗带来新的新希望，不过LSECs细胞的功能复杂多样，具有一定的异质性，针对非酒精性脂肪肝的细胞治疗仍在探索中。

发明内容

本发明的目的在于提供肝脏c-kit阳性细胞在制备治疗肝病的药物中的应用，为临床治疗非酒精性肝病-肝细胞癌-终末期肝病提供了新的有效方法。

为实现上述本发明目的，本发明的技术方案是：

本发明提供了肝脏c-kit阳性细胞在制备治疗肝病的药物中的应用。

优选地，所述肝脏c-kit阳性细胞能够高表达肝脏代谢相关分子并低表达炎症分子，回输后能够减轻肝脏脂质沉积，降低肝脏炎症，促进肝细胞增殖。

优选地，所述的肝脏c-kit阳性细胞通过免疫磁珠分选获得。

优选地，所述肝病为非酒精性肝病。

优选地，上述应用包括构建非酒精脂肪性肝病小鼠模型，将分离的肝脏c-kit阳性细胞从脾脏回输，获取小鼠组织和血液标本进行治疗效果评估。

更优选地，所述肝脏c-kit阳性细胞的细胞悬液浓度为1×10⁷个/mL PBS，每只小鼠给予100μl细胞悬液。

更优选地，构建非酒精脂肪性肝病小鼠模型的方法包括：选择8周龄的健康雄性C57/B6小鼠进行造模，小鼠给予普通饲料适应性饲养1周后，更换胆碱和蛋氨酸缺乏饲料喂养6周以建立小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型。

更优选地，治疗效果评估内容包括：肝脏组织油红O染色评估肝脏脂质沉积；肝脏组织HE染色评估肝脏气球样变；肝脏组织F4/80染色评估肝脏炎症；Ki67染色评估肝细胞增殖。

本发明的有益效果是：

肝脏c-kit阳性细胞的分离方法简单易行，获取方便。肝脏c-kit阳性细胞高表达肝脏代谢相关分子并低表达炎症分子，回输后可减轻肝脏脂质沉积，降低肝脏炎症，促进肝细胞增殖。肝脏c-kit阳性细胞对非酒精性肝病具有较好的治疗作用，为临床治疗非酒精性肝病-肝细胞癌-终末期肝病提供了新的有效方法。

附图说明

图1本发明实施例流式细胞术检测分离的肝脏c-kit阳性细胞纯度。

图2本发明实施例MCD建模两周后细胞回输，回输五天后，A.HE染色观察肝脏形态学改变，B.气球样变统计。

图3本发明实施例MCD模型小鼠脾脏回输后肝脏组织脂质沉积的水平评估结果，A.油红O染色检测肝脏脂质沉积，B.脂滴沉积统计。