[发明专利]一种人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1及应用

说明书

本发明属于微生物动物细胞系领域，具体涉及人肝门部胆管癌细胞系CBC3T‑1及应用，所述的人肝门部胆管癌细胞系CBC3T‑1保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:C2022169，其性状稳定，可稳定多次传代，在保留主要临床生物学特征的前提下，具有成瘤率高，潜伏期短，均一性好等特点，丰富了胆管癌细胞库，可以成功制备胆管癌动物模型，所制得的动物模型可以用于基础研究及药物筛选，为基于中国人群遗传背景开展的研究提供了有力的科研资料，也为新药临床前研究体内实验，针对临床抗癌药物敏感性及耐药性的测试提供新的试验材料。

技术领域

本发明属于微生物动物细胞系领域，具体涉及人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1及应用。

背景技术

胆管癌是起源于胆管上皮细胞的恶性程度极高的肿瘤，仅次于肝细胞癌的常见肝脏恶性肿瘤，由于肿瘤的解剖位置不同，可分为肝内胆管癌和肝外胆管癌，肝外胆管癌又可进一步分为肝门部胆管癌以及远端胆管癌。肝门部胆管癌约占所有胆管癌的50％～70％，发生于肝左、肝右胆管交界处，仅20％～30％可获得根治性切除的机会。但是即使根治性切除后，术后复发率仍高达50％～70％，5年生存率为10％～40％。究其原因，一方面是胆管癌起病隐匿，早期诊断困难，大部分患者明确诊断时往往处于疾病的中晚期，失去外科根治性切除的时机；另一方面是胆管癌对目前化疗药物不敏感，疗效较差，导致胆管癌复发率较高。

细胞系是一种有效的体外模型系统，可以用于评估癌细胞的特征，基于它们的特性，使细胞成为原发肿瘤的直接后代。在适当的条件下，癌细胞系保留了原发肿瘤的大部分表型和基因型特性。近50年来，胆管癌细胞系已被用于(i)更好地了解胆管癌特性，(ii)研究治疗方案，(iii)在体外建立疾病模型，以及(iv)建立体内异种移植模型。通过检索发现目前全球共有胆管癌细胞系112株，其中肝内胆管癌细胞系92株，肝外胆管癌细胞系30株，地域主要分布在美国、日本、泰国。国内的研究也主要集中在肝内胆管癌，例如发明专利CN114606194A公开了一株人肝内胆管癌细胞株ICC-X1及其应用，发明专利CN107177551B公开了一种具有高成瘤能力的人肝内胆管癌细胞系及其应用；针对肝门部胆管癌细胞系的专利申请较少，仅有发明专利CN108048401A公开的人胆道癌细胞系及应用，包括：分别命名为人胆囊癌细胞系ZJU-0430、人肝门部胆管癌ZJU-0826和人肝门部胆管癌ZJU-1125，且保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号分别为：CCTCC NO:C2017174、CCTCC NO:C2017175和CCTCCNO:C2017176的人胆道癌细胞系。但是，随着癌症的不断变异，细胞系也是需要不断的更新，以便更清楚的研究肝门部胆管癌的发病机制，用药机理等，故本发明提供了一种人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1，分离自肝门部胆管中低分化腺癌，细胞折射性好，细胞生长状态良好，背景清晰，细胞多近圆形或椭圆形，群体倍增时间约为52h。所述人胆管癌细胞系在临床诊断为胆管中低分化腺癌，特征鉴定表型为CK19，Ki67阳性。所述人胆管癌细胞系在支原体检测试剂盒检测时，PCR结果为阴性，未受到支原体污染；所述细胞系增殖、愈合、侵袭、迁移能力较强，可以用于研究肝门部胆管癌的发病机制等。

发明内容

本发明要解决的技术问题就是针对现有的人胆管癌细胞系生物多样性低，尤其是细胞系建立成功率低，同时现有细胞系与临床胆管癌的生物学性状相差较大等不足，提供一种新的来源于中国人群的胆管癌细胞系。

本发明提供一种人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1，其于2022年6月30日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2022169，地址为中国武汉武汉大学，电话为027-68752319。

优选的，所述的人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1分离自肝门部胆管中低分化腺癌。

本发明的第二目的是提供一种所述人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1的子代细胞系。

本发明的第三目的是提供所述的人肝门部胆管癌细胞系CBC3T-1的应用，所述应用选自：