[发明专利]一种细胞灌流培养的方法

权利要求书

1.一种细胞灌流培养的方法，其包括：

采用一种细胞灌流培养装置进行灌流培养，所述的细胞灌流培养装置包括：生物反应装置、过滤装置、调压装置、负压装置、连接管道；

所述的生物反应装置、过滤装置、调压装置通过管道依次相连接；

所述的过滤装置的侧面与负压装置相连接；

设置灌流培养参数，启动调压装置产生交替正负压，启动负压装置控制废液排放速率并间接调整灌流培养的灌流速率；

将细胞接种于生物反应装置进行分批培养数天，开始灌流培养数天。

2.一种细胞灌流培养的方法，其包括：

采用一种细胞灌流培养装置进行灌流培养，所述的细胞灌流培养装置包括：生物反应装置、过滤装置、液位传感装置、调压装置、负压装置、连接管道；

所述的生物反应装置、过滤装置、液位传感装置、调压装置通过管道依次相连接；

所述的过滤装置的侧面与负压装置相连接；

设置灌流培养参数，启动调压装置产生交替正负压，启动负压装置控制废液排放速率并间接调整灌流培养的灌流速率；

将细胞接种于生物反应装置进行分批培养数天，开始灌流培养数天。

3.如权利要求1或2所述的细胞灌流培养的方法，其中所述的细胞为动物细胞，所述动物细胞包括HEK 293细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、HeLa S3细胞。

4.如权利要求1或2所述的细胞灌流培养的方法，所述的灌流培养参数为生物反应装置的温度维持在30～40℃，pH值为6.0～8.0，溶氧浓度即空气饱和度为10%～90%，控制搅拌速度为100～600rpm。

5.如权利要求4所述的细胞灌流培养的方法，所述的灌流培养参数为生物反应装置的温度维持在36.5℃，pH值为6.8～7.4，溶氧浓度为30%～50%，搅拌速度为150～400rpm。

6.如权利要求1或2所述的细胞灌流培养的方法，所述的调整灌流培养的灌流速率是通过取样检测活细胞密度、细胞活率、离线pH、葡萄糖、乳酸、谷氨酸、谷氨酰胺、铵离子、渗透压的信息，根据测定的信息的变化调整灌流培养的灌流速率。

7.如权利要求6所述的细胞灌流培养的方法，所述的调整灌流培养的灌流速率是通过取样检测活细胞密度、细胞活率、葡萄糖、乳酸的信息变化调整灌流培养的灌流速率。

8.如权利要求7所述的细胞灌流培养的方法，所述的葡萄糖浓度维持在大于1g/L，所述的乳酸浓度维持在小于4g/L。