[发明专利]通过电刺激的血小板的钙控制活化

说明书

本发明涉及通过电刺激的血小板的钙控制活化。本公开涉及活化的血小板产物的产生，其中以下的一个或多个由在活化过程中钙离子的存在或浓度控制：凝块存在或不存在，凝块形成(如果存在)的时刻和/或凝块(如果存在)的机械强度。在某些实施方案中，作为活化过程的一部分，在脉冲电场或化学活化剂(例如凝血酶)存在下控制钙离子浓度。

本申请是申请日为2016年12月29日，申请号为，发明名称为“通过电刺激的血小板的钙控制活化”的发明专利申请的分案申请。

背景

本文公开的主题一般涉及用于各种医学应用的血小板疗法，所述医学应用例如用于手术或创伤的治疗。某些实施方案涉及通过改变各种活化条件，包括但不限于脉冲电场的存在和特性以及钙的存在和浓度，进行血小板活化和凝血控制。

血小板凝胶(也称为“富含活化血小板的血浆”)的使用是一种新兴的治疗方法，其可以在临床或其他健康护理设施中用于各种应用，包括促进伤口愈合(例如手术后)和止血。特别是，对于许多类型的损伤和病症，例如神经损伤、腱炎、骨关节炎、心肌损伤和骨修复和再生，存在对使用血小板疗法作为伤口愈合治疗的关注。另外，对患者使用的血小板凝胶的衍生可以是自体的，意味着血小板来自患者自身的组织和/或流体。因此，来自患者的血液样品可用于衍生用于治疗该患者的血小板凝胶。

举例来说，医生可以从患者抽取血液。然后可以将血液离心以产生富血小板血浆(PRP)。在血小板活化后，血液中的血小板释放有利于和促进伤口愈合级联的生长因子和蛋白质。因此，临床工作流程可包含从患者抽取血液，离心血液以分离出血小板，以及进行离体血小板活化，例如使用牛凝血酶。然后可将活化的血小板或血小板凝胶施用于伤口或其他治疗区域。在替代地使用体内血小板活化的情况下，医生可以在不添加血小板活化剂的情况下将PRP应用于该部位。血小板活化，包括生长因子释放和凝血，通常由结缔组织内的胶原诱导。

对于这样的离体应用，其中凝血酶(例如牛凝血酶)用于诱导血小板活化，所得的生长因子水平可以基于生物反应来固定。即，不同生长因子的量和/或各自的比例或比率由基于凝血酶的活化的性质决定。因此，在这样的反应中，临床医生不能调节或操纵不同生长因子的相应量或比率，而必须改为设法使用常规活化组合物。此外，在某些临床情况下，可能需要具有或不具有凝血和/或在凝血的存在下控制凝块的机械强度或其他特性。

简要描述

在一个实施方案中，提供了用于产生活化产物的方法。根据该方法，制备富血小板血浆(PRP)样品用于活化。通过添加相应浓度的钙离子来制备PRP样品。所述相应浓度的选择是基于凝块是否要存在于使用PRP样品产生的活化产物组合物中，并且如果要存在凝血，则基于直至凝块形成的时间或凝块的机械强度中的一者或多者。PRP样品相对于电磁刺激装置的电极放置。指定一组电脉冲参数。PRP样品暴露于根据参数值产生的一个或多个电脉冲。当暴露于一个或多个电脉冲时，PRP样品产生包含一种或多种生长因子并具有特定凝血特性的活化产物组合物。

在另一个实施方案中，提供了用于产生活化产物的方法。根据该方法，制备抗凝血剂处理的富血小板血浆(PRP)样品用于活化。将钙离子添加到PRP样品中以获得选自可能浓度范围的钙离子浓度。基于使用PRP样品产生的活化产物组合物中要存在的一种或多种生长因子的目标水平来选择浓度。PRP样品暴露于电活化刺激。当暴露于电活化刺激时，PRP样品产生包含目标水平的一种或多种生长因子的活化产物组合物。在不改变电活化刺激的情况下改变钙离子浓度，使所述一种或多种生长因子的绝对或相对水平中的一者或两者变化。

在另外的实施方案中，提供了用于控制血小板凝胶中的凝块机械强度的方法。根据该方法，确定要在血小板凝胶中产生的一个或多个凝块的预期的机械强度。预期的机械强度大于仅使用凝血酶产生血小板凝胶所观察到的机械强度。基于预期的机械强度，从多个钙离子浓度中选择对应于预期的机械强度的钙离子浓度。通过活化包含选择钙离子浓度的钙离子的富血小板血浆(PRP)样品来产生血小板凝胶。使用电刺激活化PRP样品。血小板凝胶包含凝块，该凝块一旦形成，具有预期的机械强度。

附图的简要描述