[发明专利]一种山杏丛生芽诱导增殖及生根的方法

说明书

本发明公开了一种山杏丛生芽诱导增殖及生根的方法，属于植物生物技术领域。本发明针对山杏组织培养过程中丛生芽诱导和增殖系数低、叶片易黄化脱落及生根率不高等难题，以山杏健康枝条为外植体建立初代无菌培养体系；通过改良基本培养基的组分及优化细胞分裂素和生长素类植物生长调节剂的配比，诱导山杏丛生芽发生并进行快速扩增繁殖；进而通过复合生根剂诱导芽产生不定根，通过移栽驯化获得山杏再生植株。本发明实现了山杏植株的无性快速繁殖，可用于山杏优良品种高效无性繁育和工厂化规模化育苗。

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种山杏的丛生芽诱导增殖及生根的方法。

背景技术

山杏(Prunus sibirica L.)，又名西伯利亚杏，为蔷薇科杏属灌木或小乔木，具有根系发达、抗逆性强和种质资源丰富等特点，为我国北方生态脆弱地区植被恢复的优良先锋树种；此外，山杏用途广泛，种子含油量高，富含油酸(约70％)和亚油酸(25％)，可用于生产食用保健植物油，也是非粮生物柴油的理想生产原料，极具生态价值和应用价值。然而，山杏不同种源的种子含油量(为45～63％)及脂肪酸组分差异明显，通过有性繁殖的实生苗农艺性状(包括种子产量、含油量、脂肪酸组分及开花物候期等)不稳定，难以满足产业发展需要。因此，基于植物组织培养技术繁殖的山杏无性系植株具有保持母株优良性状的特性，是破解山杏实生苗品质差异问题的重要手段之一。

发明内容

山杏组织培养过程中存在丛生芽诱导率和扩繁系数低，丛生芽叶片黄化易脱落及生根移栽成活率不高等问题。为了解决上述技术难题，本发明提供了一种山杏丛生芽诱导扩繁及生根的方法，该方法以山杏茎段为外植体，通过表面消毒建立初代无菌培养体系，经丛生芽诱导、扩繁增殖、不定根诱导和移栽驯化，获得山杏再生植株；其中，

1)山杏初代培养基为含有蔗糖10～30g/L的MS培养基；

2)丛生芽诱导、扩繁增殖和不定根诱导所用的基本培养基为改良MS培养基；

3)丛生芽诱导培养基为含有下述成分的上述改良MS培养基：6-BA0.8～1.2mg/L、KT0.2～0.8mg/L、NAA0.1～0.3mg/L，蔗糖30g/L；

4)扩繁增殖培养基为含有下述成分的上述改良MS培养基：6-BA 0.2～0.8mg/L、KT0.1～0.4mg/L、NAA 0.2～0.4mg/L，蔗糖30g/L；

5)不定根诱导培养基为含有ABT3 2.0～3.0mg/L的1/2改良MS培养基。