[发明专利]一种猪源抗菌肽PMAP-37的变体

说明书

本发明涉及猪源抗菌肽PMAP‑37的变体，在PMAP‑37的基础上，通过结构、理化性质进行预测和分析，并经合成和抗菌活性验证，最终筛选到合适的抗菌肽PMAP‑37的变体，所述变体相对PMAP‑37具有提高的抑菌活性和热稳定性，具有更高的安全性，且经试验表明，所述抗菌肽变体对于大肠杆菌和肠炎沙门氏菌混合感染导致的肠炎、腹泻等症状具有治疗作用，其能够替代抗生素，用于治疗细菌感染导致的腹泻，可以减少抗生素的使用，对于养殖业而言具有十分积极的意义。

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪源抗菌肽PMAP-37的变体。

背景技术：

抗菌肽是一类具有抗菌活性的阳离子短肽的总称，是生物先天免疫的重要组成部分，通常具有广谱杀菌作用，大多数对G⁺细菌具有较强的杀灭作用，有些对G^-细菌和G⁺细菌都有杀灭作用。由于抗菌肽的作用机制不同于目前被广泛应用的抗生素，且一般不会导致细菌对其产生耐药性，因而可以用于杀灭很多耐药性细菌。抗菌肽来源十分广泛，在植物、昆虫、哺乳动物和两栖动物中均可分离得到，猪源抗菌肽是第一批分离得到的哺乳动物抗菌肽，目前在猪体内已经发现了几十种不同的抗菌肽，大致可以分为Cathelicidin家族、防御素家族以及皂苷家族，其中猪源Cathelicidin家族的抗菌肽主要从猪白细胞中分离或从骨髓组织的cDNA序列推断而来，包括PR-39、PF-1、PF-2、PMAP-23、PMAP-36、PMAP-37、PG-1、PG-2、PG-3、PG-4、PG-5等11种，其中PMAP-23和PMAP-36的研究较多，但是对于PMAP-37的研究较少。PMAP-37是最强的膜活性因子,在0.2～1.0μmol/L时引起细菌细胞内膜的渗透作用,而PMAP-23和PMAP-36杀菌活性分别在1～10和10～50μmol/L。目前国内仅有明双喜、王燕、卢刚等人对PMAP-37进行了研究，分别采用RT-PCR的方法对PMAP-37进行了扩增和表达，研究其抑菌活性。对抗菌肽新型优化设计从而得到新的抗菌肽或者提高原抗菌肽的抑菌活性、降低毒性或溶血性等是抗菌肽类药物研究的热点，对于猪源抗菌肽的结构优化也成为当前开发新型抗菌药物的研究热点。例如曹荣田等对猪源抗菌肽PMAP-23进行了优化和改造设计，得到了活性更高的抗菌肽，具有更高的安全性。然而，目前对于PMAP-37的研究极少，因而，对PMAP-37进行深入的研究，对其进行优化设计以得到具有高活性、高安全性的抗菌肽具有积极的意义。

发明内容：

本发明旨在通过对PMAP-37进行改造获得新的抗菌肽，以丰富抗菌肽的种类，获得抗菌抑菌效果更好、加工适应性更强的抗菌肽产品。

本发明涉及一种猪源抗菌肽PMAP-37的变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ IDNo.4所示，所述变体相比猪源抗菌肽PMAP-37具有增强的抑菌活性。

本发明还涉及一种猪源抗菌肽PMAP-37的变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID No.3所示，所述变体相比猪源抗菌肽PMAP-37具有增强的抑菌活性。

本发明还请求保护所述猪源抗菌肽PMAP-37的变体在制备细菌抑制剂中的应用。

本发明还请求保护所述猪源抗菌肽PMAP-37的变体在制备治疗细菌感染导致的腹泻的药物中的应用。

优选地，所述细菌为大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌中的一种或多种。

进一步优选地，所述细菌为金黄色葡萄球菌。

进一步优选地，所述细菌为大肠杆菌和肠炎沙门氏菌。

基于以上技术方案，本发明具有如下优点和有益效果：