[发明专利]用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒

说明书

本发明提供一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒，所述标志物包括粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。本发明的标志物组合与结肠癌具有极高的关联度，敏感性和特异性高达0.8以上，即本发明的诊断标志物和试剂盒具有极高的灵敏度和特异性；这在临床上是非常难得的，可用于结肠癌的早期发现，为患者争取时间，尽早开始治疗，提高患者的生存率，降低死亡率，减轻我国的医疗负担具有重大的意义。

技术领域

本发明属于诊断技术领域，具体而言，本发明涉及一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒。

背景技术

结肠癌是由于结肠粘膜上皮在环境和遗传等多种致癌因素作用下发生的恶性癌变，是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率占胃肠道肿瘤的第3位，在许多国家是导致死亡的主要病因。近年随着人民生活水平的提高和饮食结构的改变，其发病率呈逐年上升趋势，严重地威胁着人类健康。结肠癌起病隐匿，早期常无明显的临床症状，而且病情发展较慢，病人出现明显症状时大多已经到了中晚期。目前，结肠的治疗主要是以手术为主，但结肠癌转移后的化疗效果差，术后约有40％的患者出现复发，且晚期患者术后生存率较低。因此，寻找发现有价值的肿瘤标志物对于提高结肠癌的诊断和预测发生、发展及改善预后具有重要的临床指导意义。结肠癌是一种多因素协同作用的结果，与饮食、环境、遗传等密切相关，但其具体的分子机制尚未完全阐明。尽管有许多学者已经做了大量成功的关于结肠癌分子水平的研究，但是目前仍然缺乏有效地早期诊断结肠癌的分子标志物。肿瘤标志物可以有效地作为临床诊断依据，可以监听高位人群、早期诊断、指导治疗、判断治疗疗效、检测复发及转移，是肿瘤患者的重要检查指标、具有重要的临床意义。结肠癌的发生前期会有一段时间的癌前病变，如结肠息肉，因此在早期发现并阻断或延迟癌症的发展，有极其重要的意义。

结肠癌常用的诊断方法有大便潜血检查、钡剂造影、结肠镜检查和血清肿瘤标志物(tumormarkers，TM)，前两种方法敏感性较低，结肠镜检查为侵入性检查，较多患者难以接受。TM检测在癌症筛查、诊断和治疗后随访、复发的检出和预后判断中发挥着重要作用。早期大肠癌患者预后较好，但患者常无临床症状，诊断率很低。因此，筛选和建立用于癌症早期诊断的、高敏感、高特异的血清学诊断技术，提供癌症早期预警普查，具有重大意义，市场前景可观。

目前国内外广泛采用检测血清中CEA、CA242来检测结肠癌。CEA是一种糖蛋白抗原，从结肠腺癌和胚结肠黏膜组织中分离得到，是常见的结直肠癌肿瘤标记物。由于内胚层来源的恶性肿瘤如结直肠癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌等均存在CEA异常表达，且CEA释放入体循环时先经门静脉进入肝脏,而肝脏对CEA有降解作用，可影响其在外周血液中的浓度,因此CEA诊断结直肠癌不具备特异性。CA242最早是从人结直肠癌细胞Colo205单抗发现的，是一种唾液酸化的糖类抗原，与肿瘤局部宿主抗肿瘤免疫反应有关，机体免疫抑制越明显，血清CA242水平越高。研究者认为CA242更适用于胰腺癌和消化道恶性肿瘤尤其是结直肠癌的诊断。

此外，中国发明专利CN102998452B公开了一种多肽标志物Pep5酶联免疫检测试剂盒，所述检测试剂盒含有经酶标记的由保藏号为CGMCC No.5269的单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。该发明所提供的由所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体制备的检测试剂盒可用于检测肠腺癌，操作步骤简便快捷，有利于高通量地临床检测，而且检测成本低。

再例如，中国发明专利CN104808004B公开了METRNL蛋白在作为检测结肠癌的蛋白质分子标记物及在制备检测结肠癌诊断试剂或试剂盒中的用途。本发明通过免疫组织化学实验，对30对人类结肠癌组织与癌旁组织进行免疫组织化学，证实了METRNL蛋白在人类结肠癌的癌组织与癌旁组织中存在差异表达。因此，可根据METRNL蛋白在结肠组织中的表达量来检测患者是否患有结肠癌。

然而，现有技术主要针对血清进行检测，现有技术未公开从患者的粪便中获取诊断标志物。因此，对于如何提供更多的用于检测消化系统肿瘤的标志物及试剂盒，特别是结肠癌，仍然是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容