[发明专利]Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途

说明书

本发明公开了Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途，并通过使用TLR3激动剂缓解华支睾吸虫性肝纤维化。实验证明，TLR3高表达调控宿主ERK/P38信号通路磷酸化，抑制IL‑6的分泌，从而降低华支睾吸虫感染导致的肝脏炎症损伤，降低肝纤维化；TTLR3激动剂处理进一步证实TLR3高表达阻断华支睾吸虫感染引起小鼠死亡、减少肝脏荷虫量，减轻了华支睾吸虫感染所致的肝脏病变、炎症及胆管病变；减少华支睾吸虫引起的肝脏肌成纤维细胞的活化数量，缓解肝脏纤维化。TLR3作为未来开发治疗和预防华支睾吸虫性肝纤维化的新药物和疫苗靶点，均有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及先天免疫受体Toll样受体3（以下简称TLR3）新的医药用途，尤其是公开了Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途，具体涉及Toll样受体3及其激动剂在在治疗华支睾吸虫引起的肝纤维化中的应用，属于生物医学制药技术领域。

背景技术

华支睾吸虫病是由华支睾吸虫（Clonorchis sinensis）寄生在人及动物的肝脏胆管引起的一种重要的食源性人兽共患寄生虫病，与肝纤维化、肝硬化和胆管癌密切相关。目前尚无有效防控华支睾吸虫病的商业疫苗，且尚无治疗或逆转华支睾吸虫导致肝纤维化的针对性药物。因此深入认识华支睾吸虫致肝纤维化的致病机理，并基于此开发缓解华支睾吸虫性肝纤维化的药物对华支睾吸虫病的防治至关重要。

发明内容

本发明的目的在于提供Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途，基于TLR3介导的宿主先天免疫在抗华支睾吸虫感染的治疗新用途，并应用TLR3激动剂Poly（I:C）对TLR3治疗华支睾吸虫性肝纤维化的作用进行验证。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

建立华支睾吸虫感染致肝纤维化的小鼠模型，检测小鼠存活率、体重及肝内寄生虫数量，于感染的7天、15天及35天收集小鼠肝脏，检测感染小鼠肝脏病变、胆管损伤及肝纤维化变化等指标，探究TLR3治疗华支睾吸虫性肝纤维化的新作用。基于TLR3在华支睾吸虫致病中的作用，并使用TLR3的激动剂Poly（I:C）处理华支睾吸虫感染WT小鼠，检测上述指标，验证探讨TLR3治疗华支睾吸虫性肝纤维化的作用。

本发明所述的基于TLR3调节的免疫反应对华支睾吸虫致肝纤维化的治疗作用，步骤如下：

1. 华支睾吸虫致肝纤维化小鼠模型的建立

将野生型（WT）C57BL/6小鼠每组10只，分成6组，分别给予0个、50个、100个、200个、400个、800个囊蚴/只。攻虫当日及攻虫后每天称量并记录小鼠的体重及死亡率，并在攻虫后的7 d、15 d和35 d分别安乐死小鼠，取肝脏进行肝内荷虫量的统计，以确定建立华支睾吸虫致小鼠肝纤维化的囊蚴感染数量。结果发现，以200个囊蚴/鼠对C57BL/6小鼠感染华支睾吸虫后，小鼠肝内成虫回收率平均为13%-15%，感染率为100%，小鼠死亡率平均为40%。感染35天后出现明显的肝纤维化症状，可以作为后续试验中华支睾吸虫致肝纤维化小鼠模型建立的感染量。

2. TLR3缺失小鼠感染华支睾吸虫肝脏纤维化情况检测