[发明专利]水稻OsEBP89A

说明书

本发明涉及属于转基因技术领域，具体为水稻OsEBP89supgt;A/supgt;基因在改良稻米品质性状方面的应用。本发明利用水稻EREBP类转录因子OsEBP89，将其进行点突变后，命名为OsEBP89supgt;A/supgt;，并导入粳稻的基因组中，用以正向调控稻米的直链淀粉含量，包括采用粳稻日本晴为转基因受体，构建OsEBP89supgt;A/supgt;转基因植株。试验表明，本发明得到的水稻OsEBP89supgt;A/supgt;转基因植株在稻米直链淀粉含量方面有明显的提高，其它产量相关性状改变不明显。根据田间调查及考种数据，与对照相比，OsEBP89supgt;A/supgt;转基因日本晴的稻米直链淀粉含量增加约2％。

技术领域

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及一种水稻OsEBP89^A基因在改良稻米品质性状方面的应用。

背景技术

稻米的主要成分是淀粉，约占干重的90％。稻谷淀粉主要由直链淀粉和支链淀粉组成，它们的组成和比例对稻米的外观、烹饪、食用、加工和营养等品质有很大影响。其中，直链淀粉含量是决定稻米适口性、粘度、透明度和消化率的主要因素。一般来说，中低直链淀粉含量的稻米透明度较差，但煮熟的米饭柔软、适口、有光泽；高直链淀粉含量的稻米具有良好的透明度，但煮熟的米饭坚硬且不可口，不过有助于预防糖尿病和肥胖。因此，稻米直链淀粉含量的适度调控，是其品质改良的重要手段。

稻谷中的直链淀粉含量主要受Waxy(Wx)及其相关基因控制。Wx基因编码颗粒结合淀粉合成酶I，该合成酶负责水稻胚乳中长葡聚糖链(CL 85–180)的合成。在水稻长期栽培驯化过程中，通过自然突变或人工诱变，Wx基因座至少产生了10个不同的功能等位基因(Wx^a、Wx^g3、Wx^lv、Wxⁱⁿ、Wx^b、Wx^la/Wx^mw、Wx^mq、Wx^mp、Wx^op/Wx^hp和wx)。Wx基因保守位点的等位变异导致颗粒结合淀粉合酶I的活性发生变化，从而改变了其控制直链淀粉合成的能力，最终导致直链淀粉含量在稻谷中的丰富分布。已有研究表明，AP2/EREBP转录因子OsEBP89能与MYC样蛋白OsBP5相互作用，并协同调节Wx基因的表达。我们通过酵母双杂交，GST pull-down,Split-LUC和Split-YFP四个实验发现GSK3/SHAGGY样激酶OsSK41与OsEBP89相互作用。接着我们进行体外磷酸化实验并使用LC-MS/MS分析，鉴定出了OsEBP89的四个磷酸化位点(Thr28,Thr30,Ser238 and Thr257)。目前，对OsEBP89的功能研究较少，尚无关于不同磷酸态的OsEBP89涉及稻米品质性状形成及其改良的报道。

发明内容

本发明的目的之一是一种水稻OsEBP89^A基因，本发明的目的之二是水稻OsEBP89^A基因在改良稻米品质性状方面的应用，本发明的目的之三是水稻OsEBP89^A基因的表达载体的制备方法，本发明的目的之四是水稻OsEBP89^A基因的制备方法，其能够改良稻米的直链淀粉含量。

本发明采取的技术方案具体如下。

本发明提供的一种水稻OsEBP89^A基因，所述OsEBP89^A基因的编码区序列如SEQ IDNO.1所示。

可选地，所述OsEBP89^A基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种根据上述的水稻OsEBP89^A基因在改良稻米品质性状方面的应用，利用水稻OsEBP89^A基因转化粳稻品种，以改良稻米的直链淀粉含量。