[发明专利]一种戴尔福特菌D39和俊片菌M1031的土壤修复复合菌剂及制备方法

权利要求书

1.一种戴尔福特菌D39和俊片菌M1031的土壤修复复合菌剂，其特征在于，原料包括20~30重量份的戴尔福特菌（Delftia sp.）D39发酵液、5~10重量份的俊片菌（Lampropedia sp.）M1031发酵液、8~10重量份的润湿剂、60~70重量份的分散剂和1~5重量份的紫外保护剂；

所述戴尔福特菌D39由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.16844，保藏日期为2018年11月30日；

所述俊片菌M1031由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.20988，保藏日期为2020年11月2日。

2.如权利要求1所述的土壤修复复合菌剂，其特征在于，所述润湿剂包括木质磺酸钙和萘磺酸盐缩聚物。

3.如权利要求2所述的土壤修复复合菌剂，其特征在于，所述木质磺酸钙与萘磺酸盐缩聚物的质量比为3:2。

4.如权利要求1所述的土壤修复复合菌剂，其特征在于，所述分散剂为硅藻土，所述紫外保护剂为羧甲基纤维素。

5.如权利要求1所述的土壤修复复合菌剂，其特征在于，所述土壤修复复合菌剂在土壤中的接种量为2~10g∙kg^-1。

6.一种如权利要求1所述土壤修复复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将戴尔福特菌D39发酵液、俊片菌M1031发酵液、润湿剂、分散剂、紫外保护剂混合，搅拌均匀；

（2）将混合后的原料放入气流粉碎机粉碎，粉碎后过筛，制得土壤修复复合菌剂。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述戴尔福特菌D39发酵液采用以下方法制成：

S1、取保藏的戴尔福特菌D39菌株划线于LB固体培养基上，25~30℃倒置活化培养1~2d，制得活化后的菌株；

S2、向500mL三角瓶中装入100~150mL的LB液体培养基，LB液体培养基pH为7.0~7.5，取活化后的菌株接种于LB液体培养基中，接种量为4%~8%，于30~32℃摇床振荡培养2~3d，制得菌液；

S3、向盛有发酵培养基A的500L发酵罐中，接种菌液，初始接种量4%，转速350r∙min^-1，溶氧5mmol∙L^-1，流加氨水控制pH=7.0，温度32℃，发酵40~52h，制得戴尔福特菌D39发酵液；

所述发酵培养基A以质量份数计，包括玉米粉2份，豆粉2份，葡萄糖1份，硫酸铵0.1份，磷酸氢二钾0.2份，磷酸二氢钾0.2份，七水硫酸镁0.03份，去离子水补足至100份。