[发明专利]一种富集和检测烟草中4-甲基亚硝胺基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮的方法

说明书

本发明公开了一种富集检测烟草中4‑甲基亚硝胺基‑1‑(3‑吡啶基)‑1‑丁酮(NNK)的方法，包括以下步骤：(1)制备烟草检测液；(2)富集NNK：采用磁性树枝状分子印迹识别吸附材料分离并富集烟草步骤(1)得到的甲醇溶液中的NNK；(3)检测：采用高效液相色谱法检测NNK。本发明的方法可以选择性富集和检测烟草中N‑亚硝胺类物质NNK，具有灵敏度高、选择性好、分析速度快、重现性好的优点。在烟草质量控制和成分分析中有广阔的应用前景。

技术领域

本发明专利属于分析化学领域，具体涉及一种富集和检测烟草中4-甲基亚硝胺基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的分析方法。

背景技术

烟草及烟草制品中的低丰度N-亚硝胺类物质与复杂基质成分共存，富集与检测存在样品处理方法繁杂和缺乏选择性的问题，难以达到针对性富集与简便快捷的检测要求。

现有技术中针对烟草NNK的分析检测研究，如专利CN108956802A和专利CN110646536A的检测方法，为该目标物的检测提供了易于推广应用的思路。但是，上述专利CN110646536A使用的分析方法，需要较长的时间和复杂的仪器设备；专利CN108956802A缺乏对某一具体目标物的选择识别性，在烟草这类复杂基质背景的样品分析中，易受到干扰，影响测定的准确性和灵敏度。因此需要建立一个选择性富集和简便快捷的检测NNK的分析方法。

分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers，MIPs)具有预定性、识别性以及广泛使用性，在食品药品和环境污染物或残留物的分离、富集和分析中的应用发展迅速。MIPs对特定目标化合物空间结构的“记忆”效应和对作用位点的“识别”作用，能够高选择性富集分离复杂体系中的目标分子。此外，与常规的“本体聚合”相比，“表面印迹”聚合技术使得残留模板大大减少，增加有效“印迹”容量，减少传质阻力，具有比表面积大、吸附量高、吸附和解吸动力学良好等特性。

树枝状聚合物(dendrimers)是一类新型高分子纳米材料，它的潜在应用价值已引起科学家的广泛关注。其结构规整、质量可控、通畅的分子骨架结构内外都能富含大量功能基团，并可针对MIPs纳米结构需求进行功能化设计。近年来基于磁性纳米材料表面树状纳米结构的MIPs研究报道较少。磁性材料使得富集过程极为简便，省去、离心、过滤等繁杂操作。将磁性树枝状分子印迹富集目标物和高效液相检测相结合，可更好满足产品质量控制的需求。为此提出本发明。

发明内容

本发明提供了一种富集和检测烟草中4-甲基亚硝胺基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的方法。本发明的方法创新性地优化了目标物富集方法和液相检测方法，实现了烟草中NNK的高选择性、高灵敏度、低干扰、简便快捷的检测分析。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。

一种富集检测烟草中4-甲基亚硝胺基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的方法，包括以下步骤：

(1)制备烟草检测液：将烟草加入含有乙酸铵的水溶液中，超声处理一段时间，收集上清液，经微孔滤膜过滤得到滤液，氮气吹干，用甲醇复溶得到甲醇溶液；

(2)富集NNK：采用磁性树枝状分子印迹识别吸附材料分离并富集烟草步骤(1)得到的甲醇溶液中的NNK；

(3)检测：采用高效液相色谱法检测步骤(2)的甲醇溶液中的NNK。

优选地，步骤(1)烟草与含有乙酸铵的水溶液的质量比为1:(5-500)；超声提取5-120分钟；微孔滤膜的孔径为0.1-0.5μm。