[发明专利]一种M蛋白检测的方法

说明书

本发明涉及生物医学领域，特别是涉及一种M蛋白检测的方法，所述方法包括：1)提供待测样本中免疫球蛋白轻链单电荷离子的m/z分布数据，所述轻链包括λ轻链和κ轻链；2)结果判定：若轻链m/z范围内具有基底窄、峰高且尖锐的质谱峰，则判定待测样本中含有M蛋白，或，若κ轻链：λ轻链的峰面积比值小于1.8或大于3.5，且峰形为非高斯分布，则判定待测样本中含有M蛋白。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，特别是涉及一种M蛋白检测的方法。

背景技术

单克隆性丙种球蛋白病(MG)是一种以浆细胞克隆性扩增为特征的疾病，被分类为低肿瘤负荷疾病、癌前病变和恶性肿瘤等阶段。低肿瘤负荷疾病没有大量的浆细胞克隆增殖，但分泌的单克隆蛋白会直接引起病变，如免疫球蛋白轻链淀粉样变性；癌前病变包括意义未明的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)和冒烟型多发性骨髓瘤(SMM)，它们不表现出可归因于浆细胞克隆或单克隆蛋白的症状。多发性骨髓瘤(MM)是MG中最常见的恶性肿瘤疾病之一，是一种好发于中老年人的恶性血液肿瘤，其特征是单克隆浆细胞恶性增殖并分泌大量单克隆蛋白(M蛋白)。M蛋白是一种与MG患者的克隆性浆细胞负荷直接相关的血清生物标志，可以作为作识别疾病的诊断标志物和跟踪疾病进展和对治疗的反应的定量标志物。M蛋白的识别、分型和定量有助于疾病的初步诊断、风险分层和监测对治疗的反应等。

正常人的免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)由两条相同的轻链及两条相同的重链组成。两条相同的轻链即为κ或λ，不存在Ig同时结合κ和λ两种轻链。骨髓瘤患者体内的单克隆免疫球蛋白轻链会抑制另一种轻链的生成，从而使κ/λ比值失去平衡，比值的升高或降低分别提示患κ或λ型多发性骨髓瘤的可能。若患者血清中出现大量M蛋白，血清Ig成分发生变化，如不同Ig同种型的相对含量、轻链κ/λ比值等。κ/λ比值的失衡是区分MM浆细胞单克隆性增生与其他疾病的重要指标。大多数新诊断的多发性骨髓瘤患者，其M蛋白浓度很高，但在治疗后不久，M蛋白浓度发生显著变化，通常在几个月内下降几个数量级，提示恶性克隆浆细胞逐渐被消除。目前血清蛋白质电泳(PEL)、免疫固定电泳(IFE)和血清游离轻链比浊法(sFLC)可用于检测、监测和量化M蛋白。但血清蛋白电泳主要筛查是否有M蛋白；免疫固定电泳主要对M蛋白分型，PEL和IFE是低通量电泳技术，检测灵敏度不高，无法检测低水平的M蛋白，在有效治疗后监测多发性骨髓瘤疾病活动时很快就无法检测到，显然这些方法不能用于早期发现疾病复发，导致漏诊率高。此外，对实验结果的解读需要有经验的实验室工作人员，因此存在不同人员解读的差异，导致电泳结果评判标准在不同实验室不同工作人员解读中存在不一致现象，因此在筛查方法标准化方面很难做到统一。高通量的比浊法是目前认为分析敏感最高的一种间接证明M蛋白存在的测量方法，但并非所有多发性骨髓瘤患者诊断时sFLC比率异常。而且，血清游离轻链比浊法(sFLC)存在抗原过量、非线性反应和抗体试剂成本高等问题，导致sFLC仍无法在大量临床实验室开展。随着多发性骨髓瘤患者对新化疗和免疫疗法的治疗反应的显著改善，大多数多发性骨髓瘤患者现在可以实现持久缓解，常规用于M蛋白诊断的传统电泳方法将面临着新的挑战。因此，能够检测低水平M蛋白的高灵敏度方法对于提供评估微小残留疾病(MRD)很重要。质谱法是一种在研方法，使用高分辨率分子量检测来准确鉴定血清中的M蛋白，并对其进行分类。在美国梅奥医学中心，MALDI-TOF质谱法已取代免疫固定电泳来鉴定M蛋白。但目前在研的质谱法需要使用抗体进行捕获，导致检测成本较高。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种M蛋白检测的方法，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种M蛋白检测的方法，所述方法包括如下步骤：

1)提供待测样本中免疫球蛋白轻链和重链单电荷离子的m/z分布数据，所述轻链包括λ轻链和κ轻链；