[发明专利]一种提高免疫功能的鲜食葡萄多糖及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种提高免疫功能的鲜食葡萄多糖及其制备方法和应用，属于鲜食葡萄提取技术领域。本发明通过响应面法筛选出了鲜食葡萄多糖提取的最优提取方法，并且按照该方法提取出了鲜食葡萄多糖。通过实验，本发明发现北醇鲜食葡萄多糖可以有效的提高巨噬细胞的增殖能力；提高巨噬细胞NO的产生；促进巨噬细胞中细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E1的mRNA表达；抑制巨噬细胞中细胞周期蛋白cyclin B1；促进巨噬细胞分泌炎症因子TNF‑α和IL‑6；恢复环磷酰胺导致的脾脏免疫功能损伤，因此，其在医药领域应用前景十分广阔。

技术领域

本发明属于鲜食葡萄提取技术领域，尤其涉及一种提高免疫功能的鲜食葡萄多糖及其制备方法和应用。

背景技术

鲜食葡萄为葡萄科葡萄属木质藤本植物，小枝圆柱形，有纵棱纹，无毛或被稀疏柔毛，叶卵圆形，圆锥花序密集或疏散，基部分枝发达。葡萄是世界最古老的果树树种之一，葡萄的植物化石发现于第三纪地层中，说明当时已遍布于欧、亚及格陵兰。葡萄原产亚洲西部，世界各地均有栽培，世界各地的葡萄约95％集中分布在北半球。目前，提取植物多糖的方法有热水浸提法、酸碱溶液提取法、微波提取法、超声提取法等多种方法，其中超声提取法操作简单，并且可以在较低温度、较短时间下获得较高的得率，已被开发运用在多种植物活性成分的提取中。超声提取法需考察的影响因素较多，而设计结合响应面法可确定影响得率的关键因素，并对其进行优化。响应面实验设计是一种回归试验设计方法，通过相关实验采集数据，采取多元二次回归方程进行拟合自变量(试验因素)和响应值(试验指标)之间的函数关系，建立相应的数学模型，对二次多项式回归方程的计算分析来寻求最优工艺参数，是解决多变量问题的一种统计方法，其预测结果可信度高，能够快速确定多因素系统的最佳实验条件。

鲜食葡萄中含有丰富的糖类，但目前鲜食葡萄中糖类成分药理活性研究资源缺乏。本发明通过体内体外实验验证鲜食葡萄多糖的免疫调节作用，对新的免疫药物开发提供研究方向。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高免疫功能的鲜食葡萄多糖及其制备方法和应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了一种提高免疫功能的鲜食葡萄多糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)在干燥并粉碎的鲜食葡萄中按照1:3的料液比加入蒸馏水，浸泡2h后，采用400w超声提取30min，得到鲜食葡萄提取液；

(2)采用减压浓缩的方式将鲜食葡萄提取液浓缩为原体积的20％，加入无水乙醇至乙醇终浓度为80％，4℃醇沉24h；

(3)离心后收集沉淀，利用Sevage法脱蛋白，AB-8型大孔树脂除色素；

(4)使用截留分子量3500Da的透析袋流水透析48h，最后冻干得到鲜食葡萄粗多糖。

优选地，所述鲜食葡萄为北醇、黑香峰、黑香蜜、沁香、玉波2号、玫瑰香、藤稔、卓越玫瑰、阳光玫瑰中的一种。

本发明提供了鲜食葡萄多糖在制备提高免疫功能的药物中的应用，所述鲜食葡萄多糖的制备方法包括如下步骤：

(1)在干燥并粉碎的鲜食葡萄中按照1:3的料液比加入蒸馏水，浸泡2h后，采用400w超声提取30min，得到鲜食葡萄提取液；

(2)采用减压浓缩的方式将鲜食葡萄提取液浓缩为原体积的20％，加入无水乙醇至乙醇终浓度为80％，4℃醇沉24h；

(3)离心后收集沉淀，利用Sevage法脱蛋白，AB-8型大孔树脂除色素；

(4)使用截留分子量3500Da的透析袋流水透析48h，最后冻干得到鲜食葡萄粗多糖。

优选地，所述药物具有如下功能：