[发明专利]基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法

权利要求书

1.一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：方法依次包括如下步骤：

(1)合成掺杂有镧系元素的上转换纳米颗粒；

(2)步骤(1)得到的上转换纳米颗粒溶解于环己烷，再加入氨水搅拌，加入四乙氧基硅烷TEOS反应生成水溶性二氧化硅并包覆在上转换纳米颗粒上；再依次用环己烷和无水乙醇的混合液、无水乙醇、去离子水洗涤，洗涤后用去离子水收集，收集后在真空干燥；

(3)将蚕茧脱胶后形成的纤维状丝素溶解，依次经过过滤、透析、浓缩后获得丝素蛋白水溶液，调节丝素蛋白水溶液中的丝素蛋白浓度为10mg/mL；

(4)将待测的抗生素和显色剂混合制备获得显色剂-抗生素络合物水溶液；

(5)将步骤(2)得到的上转换纳米颗粒用去离子水溶解并超声分散，加入步骤(3)中的丝素蛋白水溶液与步骤(4)中的水溶液，在搅拌后加入等体积的诱导试剂，获得外包有丝素蛋白及抗生素的上转换纳米颗粒；

(6)将外包有丝素蛋白及抗生素的上转换纳米颗粒离心后去离子水回收，回收后用激发光下测量荧光强度，根据荧光强度判断待测抗生素的浓度实现抗生素检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，上转换纳米颗粒采用高温热沉淀法或者热分解法合成。

3.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，合成的上转换纳米颗粒的尺寸为10～100nm。

4.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，四乙氧基硅烷TEOS反应生成水溶性二氧化硅的反应时间为6～24h。

5.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，真空干燥的温度为40～100℃，真空干燥的时间为4～48h。

6.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，采用的抗生素包括头孢类抗生素，如头孢曲松、头孢羟氨苄、头孢唑啉；喹诺酮类抗生素，如甲磺酸培氟沙星、加替沙星、盐酸芦氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星；大环内酯类抗生素，如罗红霉素、红霉素、竹桃霉素、螺旋霉素、泰乐霉素、红霉素、琥珀酸乙酯、琥乙红霉素、克拉霉素、阿奇霉素；其他类抗生素，如克霉唑、氨苄西林钠等。

7.根据权利要求6所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，显色剂为能使得显色剂-抗生素络合物的吸收峰与所述上转换纳米颗粒的发射峰有重叠的显色剂。

8.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，搅拌的转速为100～1000rpm，搅拌的时间为2～24h。

9.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，诱导试剂采用乙醇、甲醇或者丙三醇。

10.根据权利要求1所述的一种基于上转换纳米颗粒-丝素蛋白纳米探针体系检测抗生素的方法，其特征在于：所述步骤(6)中，激发光的波长为980nm，荧光强度的测量波段范围是500nm～600nm。