[发明专利]一种罗汉果醇的生物合成方法

权利要求书

1.一种罗汉果醇的生物合成方法，其特征在于，利用糖苷酶催化罗汉果粗提物水解获得罗汉果醇，其中所用糖苷酶为果胶酶或蜗牛酶。

2.根据权利要求1所述的罗汉果醇的生物合成方法，其特征在于，利用有机试剂与反应缓冲液构建双相酶促反应体系，水解罗汉果提取物制备罗汉果醇；有机试剂选自甲基叔丁基醚或甲苯。

3.根据权利要求2所述的罗汉果醇的生物合成方法，其特征在于，缓冲液选自pH为4.0-7.0的缓冲液，缓冲液选自柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液和醋酸钠-醋酸缓冲液。

4.根据权利要求2所述的罗汉果醇的生物合成方法，，其特征在于，所述的双相酶促反应体系中采用蜗牛酶，蜗牛酶的用量为5 mg/mL-15 mg/mL; 罗汉果提取物的浓度为10-20mg/mL；甲苯体积浓度为10%-70% V/V。

5.根据权利要求2所述的罗汉果醇的生物合成方法，其特征在于，所述的双相酶促反应体系的反应pH为4.0-7.0；反应温度为35℃-60℃；反应时间为0-24小时。

6.根据权利要求2所述的罗汉果醇的生物合成方法，其特征在于，其特征在于步骤包括：

将蜗牛酶和罗汉果提取物加至缓冲液，加入甲苯，混合均匀后，得双相反应体系；反应结束后，静置2 h后，两相分离，收集甲苯层；水层用乙酸乙酯萃取；除去甲苯和乙酸乙酯，合并罗汉果醇粗提物；粗提物溶解于20% V/V乙醇溶液后利用聚酰胺树脂柱分离纯化，乙醇-水溶液梯度洗脱，合并收集含高纯度罗汉果醇得洗脱液，干燥后得罗汉果醇。