[发明专利]一种亚甲基蓝类近红外荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明公开亚甲基蓝类近红外荧光探针及其制备方法和应用，属于荧光探针技术领域。探针分子式为：C₂₈H₃₁N₅O₂S，结构式如下：本发明探针合成步骤简单，探针与次氯酸HClO反应后产生强的红色荧光，最大发射波长在近红外区域。与现有的HClO荧光探针相比，该探针能够在复杂体系下专一性的检测HClO的含量，并且具有肝肿瘤细胞靶向性。本发明是一种简单，快速，灵敏的HClO特异性检测试剂，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种亚甲基蓝类近红外荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

次氯酸(HClO)是生物体内一种重要的活性氧物种，主要由过氧化氢和氯离子在髓过氧化酶(MPO)催化反应下产生，具有抗菌杀菌作用。(文献1:Klebanoff S J,Kettle A J,Rosen H,Winterbourn C C,Nauseef W M.Myeloperoxidase:a front-line defenderagainst phagocytosed microorganisms.J Leukoc Biol.2013；93(2):185-198)。然而，它的异常表达涉及各种氧化应激相关的病理生理过程，如心血管疾病、关节炎和神经退行性疾病。(文献2：Daugherty A,Dunn J L,Rateri D L,Heinecke J W.Myeloperoxidase,acatalyst for lipoprotein oxidation,is expressed in human atheroscleroticlesions.J Clin Invest.1994；94(1):437-444；文献3:Gorrini C,Harris I S,Mak TW.Modulation of oxidative stress as an anticancer strategy.Nat Rev DrugDiscov.2013；12(12):931-947)。因此，直接、快速、灵敏、选择性地检测生命系统中内源性HOCl对更好地理解HOCl相关的化学生物学至关重要。目前，已有化学发光法、比色法、电化学法和色谱法对HOCl进行检测(文献4：Andina D,Leroux J C,Luciani P.Ratiometricfluorescent probes for the detection of reactive oxygenspecies.Chemistry.2017；23(55):13549-13573)。这些方法具有优异的灵敏度和选择性。然而，这些方法不能满足离体样本中HOCl的无创实时原位成像。

相较于这些现有分析方法，荧光探针由于其制备和操作简单、选择性和灵敏度高、对组织无损、成像保真度高，是检测HClO有效的检测方法。(文献5：Wang J,Ni Y,Shao S.Areversible fluorescence probe for detection of ClO^-/AA redox cycle in aqueoussolution and in living cells.Talanta.2016；147:468-472)此外，相较于可见光区的荧光探针，本发明近红外荧光探针可有效避免生物背景荧光干扰，使探针能够获得较高的信噪比，并降低生物样品的光损伤。该探针灵敏性高，选择性强、细胞毒性低，能应用于检测活细胞内HClO水平的变化。

发明内容

本的目的在于提供一种亚甲基蓝类近红外荧光探针，该荧光探针发射在近红外区，可高灵敏度、高选择性的检测HClO，并能对细胞中HClO进行荧光成像。

为实现上述技术目的，本发明所采用的技术方案为：

一种亚甲基蓝类近红外荧光探针，其分子式为：C₂₈H₃₁ N₅O₂S，结构式如下：本发明探针均称为MB-MT。

一种亚甲基蓝类近红外荧光探针的制备方法为，其特征在于，包括以下步骤：