[发明专利]一株植物乳杆菌NHE-LpE5及应用

说明书

本发明提供了一株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）NHE‑LpE5，涉及畜牧饲用益生菌技术领域。该菌分离自仔猪肠道，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101），保藏编号为CGMCC NO.24432，保藏日期为2022年2月28日。

技术领域

本发明涉及畜牧饲用益生菌技术领域，尤其涉及一株益生植物乳杆菌NHE-LpE5及应用。

背景技术

断奶仔猪由于基体的细胞免疫能力和免疫抗体水平出现了下降，因此病原菌容易在其肠道内生长，因此仔猪的健康生长会受到影响。目前，在实际生产中，通常是采用抗生素来治疗和预防自主疾病，从而实现减缓应激和促进生长的目的。

但是，抗生素在规模化养殖中的长期使用会导致病原体的耐药性，并且会导致肉食品中的兽药残留和环境污染。因此需要新的抗生素替代品来替代抗生素。

益生菌是常见的抗生素的替代品之一，其对于猪的生长性能和疾病的防治具有积极的作用。现有的研究表明，益生菌可以有效的补充肠道内微生物的不足，提高仔猪的抗病能力。但是现有的菌株功能多较为单一，依然存在着较多的不足，因此，开发更多性能优良的菌株依然是目前急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于一株植物乳杆菌NHE-LpE5及应用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

其一，本发明提供了一株植物乳杆菌NHE-LpE5，分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NHE-LpE5，于2022年2月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.24432，保藏地址为中国北京。

优选地，所述植物乳杆菌NHE-LpE5是从新鲜仔猪肠道内容物中分离的植物乳杆菌，通过菌落形态观察、分子生物学鉴定等确定其为植物乳杆菌，其16SrDNA序列如SEQ IDNO.1所示。

优选地，所述植物乳杆菌NHE-LpE5具有以下微生物学特性：菌株E5在MRS平板上能良好生长，培养48h，形成圆形菌落，菌落直径1-2mm，呈乳白色，表明光滑，不透明，中间凸起，边缘整齐，革兰氏阳性，呈杆状，无芽孢，兼性厌氧，生长适宜温度范围为15℃-40℃，最佳生长温度为25℃-35℃，生长pH为3.0-8.0，最适pH为5.0-7.0。

优选地，所述植物乳杆菌NHE-LpE5的培养方法如下：

取植物乳杆菌NHE-LpE5(保藏编号为CGMCC NO.24432)种子液(活菌浓度为10⁹CFU/mL)3mL，接种于300mL摇瓶发酵培养基中进行摇瓶发酵培养；摇瓶发酵结束后进行发酵罐发酵培养，取1.2L摇瓶发酵种子液接种到100L发酵罐中的发酵培养基中进行发酵培养，100L发酵罐装液量为70L发酵培养培养基。发酵结束后，检测发酵液活菌数为3.5×10¹⁰CFU/mL。

所述摇瓶发酵培养基由下述组分组成：蔗糖0.5-4％，葡萄糖0.5-2.5％，酵母浸粉0.5-3.0％，大豆蛋白胨0.5-2.5％，氯化镁0.01-0.5％，碳酸钙0.01-1.0％，硫酸锰0.01-0.5％，余量为水。

优选为：蔗糖1％，葡萄糖1％，酵母浸粉0.5％，大豆蛋白胨1.2％，氯化镁0.1％，碳酸钙0.1％，硫酸锰0.04％，余量为水。

所述摇瓶发酵条件为：接种量1％(体积比)，发酵温度为32℃、初始pH6.5、200r/min，发酵时间8h。