[发明专利]超高效液相色谱串联质谱测定草地贪夜蛾农药含量的方法

说明书

本发明公开了一种环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺在草地贪夜蛾中的超高效液相色谱串联质谱检测方法，该方法包括以下步骤：(1)提取；(2)净化；(3)超高效液质联用仪测定：采用液相色谱分离柱分离所述待测样液中的环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺残留，质谱进行检测，即得到草地贪夜蛾中环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺的残留含量。本发明方法的前处理操作简单方便，净化效果好，具有回收率高、重现性好、有机溶剂用量少的优点，4种农药的最低检测浓度均较低，适合于环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺在草地贪夜蛾中的分析检测。

技术领域

本发明涉及农药检测技术领域，具体涉及一种超高效液相色谱串联质谱测定草地贪夜蛾中环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺、四氯虫酰胺的方法。

背景技术

环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺均属于双酰胺类杀虫剂(diamide insecticides)，该类杀虫剂是近年来继新烟碱类杀虫剂后，市场使用量最大的一类农药。作用机制为通过激活鱼尼丁受体钙通道而引发胞内钙离子大量释放，导致昆虫肌肉收缩、麻痹而死亡。双酰胺类杀虫剂具有广谱、高效、低毒、安全的特点，受到了国内外研究机构的广泛关注。四氯虫酰胺、环溴虫酰胺和四唑虫酰胺分别于2014、2017、2020年上市，截止目前氯氟氰虫酰胺仍未有获得中国正式登记的报道。双酰胺类杀虫剂结构新颖，作用机制独特，防虫效果卓越，是防治鳞翅目等咀嚼式口器害虫的首选。

草地贪夜蛾自2019年1月入侵我国以来，迅速成为玉米上的重大迁飞性害虫。化学农药是控制草地贪夜蛾暴发为害的主要方法和应急手段。由于草地贪夜蛾入侵时间短，国内登记注册的化学农药较少，仅有5种，分别为氯虫苯甲酰胺、虱螨脲、乙基多杀菌素、噻虫嗪和溴氰虫酰胺。目前，草地贪夜蛾已经成为我国农业生产上一种新的常发性重大害虫，我国登记的农药品种远不足以应对草地贪夜蛾的危害。据相关文献报道，双酰胺类农药对草地贪夜蛾具有良好的防效，被广泛推广应用。通过检测草地贪夜蛾体内双酰胺类杀虫剂的残留量，结合农药防效试验，从而明确双酰胺类杀虫剂的田间使用剂量，达到精准防治草地贪夜蛾的目标。农药前处理过程中的提取和净化步骤是影响定量结果准确性的重要因素，需要在满足灵敏度条件下，最大限度将杂质去除，可避免污染仪器，尤其是液质联用仪，确保结果的准确性和可重复性。

发明内容

为了解决上述至少一个技术问题，提供一种环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺在草地贪夜蛾中的检测方法，满足生产中对准确度、精密度和灵敏度的要求。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种草地贪夜蛾中环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺的超高效液相色谱串联质谱分析方法，包括以下步骤：

S1提取：将草地贪夜蛾试样匀质后与提取溶剂和提取盐混合，经振荡提取得到提取液，取上清液I；

S2净化：将步骤S1中得到的上清液I与净化剂混合进行净化，收集上清液II，经过滤得到待测样液；

S3超高液质联用仪测定：采用液相色谱分离柱分离所述待测样液中的环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺残留，质谱进行检测，即得到草地贪夜蛾中环溴虫酰胺、氯氟氰虫酰胺、四唑虫酰胺和四氯虫酰胺的残留含量。

进一步的，本发明所述的分析方法可以将草地贪夜蛾替换为鳞翅目的其它咀嚼式口器害虫。

优选的，作为一个较佳的实施方式，所述步骤S1中，提取溶剂为乙腈、含0.5％甲酸的乙腈、含0.5％乙酸的乙腈中的一种或多种。

优选的,作为一个较佳的实施方式，所述步骤S1中的提取溶剂为0.5％乙酸的乙腈。

优选的，作为一个较佳的实施方式，所述步骤S1中，草地贪夜蛾试样的质量与所述提取溶剂的体积比为1:5～10,最优选的，所述质量体积比为1:5。