[发明专利]草鱼CD3e杂交瘤细胞株及单克隆抗体和应用

说明书

本发明提供了一种草鱼CD3e杂交瘤细胞株及单克隆抗体和应用，该杂交瘤细胞株已于2022年8月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：C2022215；该草鱼CD3e单克隆抗体由杂交瘤细胞株分泌得到，该草鱼CD3e单克隆抗体在制备检测草鱼CD3e蛋白的试剂或试剂盒中得以应用；利用该单克隆抗体可以通过酶联免疫吸附剂测定、蛋白质印迹法、免疫荧光测定免疫组织化学和流式细胞术等免疫学方法简便、快速、准确地检测出草鱼CD3e蛋白的表达水平。另外，该草鱼CD3e单克隆抗体特异性好，灵敏度高，可为鱼类免疫学基础研究提供工具，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种草鱼CD3e杂交瘤细胞株和其分泌的CD3e单克隆抗体，以及草鱼CD3e单克隆抗体的制备方法和应用。

背景技术

T细胞是淋巴细胞的主要组分，它具有多种生物学功能，如直接杀伤靶细胞、辅助或抑制B细胞产生抗体以及产生细胞因子等，在抵御疾病感染、肿瘤的形成中发挥重要作用。T细胞产生的免疫应答是细胞免疫，在机体的免疫反应中具有重要地位。CD3e分子也称为CD3E，是一种T细胞表面单程I型膜糖蛋白。CD3e分子包含1个Ig样(免疫球蛋白样)结构域和1个ITAM结构域。CD3e分子与CD3-γ、CD3-δ和CD3-ζ以及T细胞受体α/β和γ/δ杂二聚体一起形成T细胞受体-CD3复合物。这种复合物在抗原识别与多种细胞内信号转导途径耦合方面发挥着重要作用。

草鱼是我国最重要的淡水养殖品种之一，由于其肉质鲜美，价格低廉，备受消费者喜爱。近年来，由于养殖密度不断增加，过量投饵及水质严重恶化等因素，养殖草鱼的病害也越来越多，造成了大量死亡，严重阻碍了草鱼养殖业的可持续发展。而免疫系统在鱼类的疾病防控及免疫调节中发挥重要作用。其中CD3是T淋巴细胞最重要的细胞表面标志物之一，在抗原识别过程中具有重要的信号传递功能。草鱼CD3e单克隆抗体的制备，可以为鱼类免疫系统的研究提供工具，在加深对草鱼免疫系统研究的同时也可以加深对鱼类抗病机理的认识。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明的目的是提供一种草鱼CD3e杂交瘤细胞株及单克隆抗体和应用。

为达到上述目的，本发明的解决方案是：

第一方面，本发明提供了一种草鱼CD3e杂交瘤细胞株，该草鱼CD3e杂交瘤细胞株的保藏编号为：CCTCC NO：C2022215，该杂交瘤细胞株是采用草鱼CD3e蛋白作为抗原免疫小鼠得到的，将其命名为杂交瘤细胞株GC9-CD3e，已于2022年8月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：中国武汉市武汉大学。

第二方面，本发明提供了一种草鱼CD3e单克隆抗体，该草鱼CD3e单克隆抗体由上述的草鱼CD3e杂交瘤细胞株分泌得到。

作为本发明的一种优选实施例，草鱼CD3e单克隆抗体的制备方法包括：取上述的杂交瘤细胞株的培养上清液和/或将上述的杂交瘤细胞株注射于小鼠腹腔，抽取腹水并离心，纯化，得到草鱼CD3e单克隆抗体。

第三方面，本发明提供了一种草鱼CD3e单克隆抗体的应用，该草鱼CD3e单克隆抗体在制备检测草鱼CD3e蛋白的试剂或试剂盒中的应用。

第四方面，本发明提供了一种检测草鱼CD3e蛋白的试剂或试剂盒，其包括上述的草鱼CD3e单克隆抗体。

作为本发明的一种优选实施例，试剂盒选自酶联免疫吸附剂测定试剂盒、蛋白质印迹法试剂盒、免疫荧光测定、免疫组织化学试剂盒和流式细胞术试剂盒中的一种以上。