[发明专利]一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法

权利要求书

1.一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤1、定量LDL：称取一定量新鲜的LDL，先用0.1mol/L的PBS缓冲液稀释，得到50mg/L的LDL溶液，再加入1μmol/L的铜锌超氧化物歧化酶和4μmol/L的ZnSO₄，使LDL溶液的终浓度为5mmol/L；

步骤2、合成OX-LDL：将LDL溶液于36.0-37.0℃水浴24h后，转入透析袋中，先在含5mol/LCuSO₄的PBS缓冲液中室温透析24h，然后在含0.1％EDTA-2Na的PBS缓冲液中室温透析24h，除菌保存；

步骤3、建立泡沫细胞模型：将RAW264.7细胞置于含10％胎牛血清的RPMI 1640培养液中，于36.0-37.0℃恒温培养24h后，弃原液，加入含3％胎牛血清的RPMI 1640培养液和OX-LDL，共同孵育24h，得到泡沫细胞。

2.根据权利要求1所述的一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：步骤1中，制备得到的LDL溶液于2-8℃保存。

3.根据权利要求1所述的一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：步骤2中，第一次透析的温度为36.0-37.0℃，第二次透析的温度为4℃。

4.根据权利要求1所述的一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：步骤2中，透析后的溶液用0.22um微孔滤膜过滤除菌，制备得到的OX-LDL于4℃保存。

5.根据权利要求1所述的一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：步骤2中，OX-LDL的浓度为80mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法，其特征在于：步骤3中，泡沫细胞的细胞浓度控制在10⁶个/mL，每两天换培养液一次，每四天传代一次，所述培养液为含10％胎牛血清的RPMI 1640培养液。