[发明专利]ERBB2 S310F突变的抗体在制备诊断检测胆囊癌中的应用

说明书

本发明提供了一种ERBB2S310F突变的抗体在制备诊断检测胆囊癌中的应用，该突变引起胆囊癌中PD‑L1表达升高，抗体特异性识别人的胆囊癌中ERBB2S310F突变，同时进行免疫组织化学检测；该抗体的制备包括：ERBB2氨基酸序列中第310位野生型的丝氨酸突变为苯丙氨酸，然后免疫兔子，经过纯化即可；之前对ERBB2S310F突变的检测主要通过外显子组测序，这样需要消耗的时间和费用较多，不利于临床开展对ERBB2S310F突变的检测。同时病理诊断较为便捷，也是肿瘤诊断的金标准，本发明依据ERBB2S310F突变多肽制备的抗体可以进行免疫组织化学的检测，并用于胆囊癌的临床病理诊断。

技术领域

本发明属于抗体检测技术领域，具体涉及一种ERBB2 S310F突变的抗体在制备诊断检测胆囊癌中的应用。

背景技术

ERBB家族(epidermal growth factor receptor,ERBB,上皮生长因子家族)包括ERBB1/EGFR、ERBB2/HER2、ERBB3和ERBB4四个成员。其中ERBB2在包括乳腺癌、胆囊癌等多种肿瘤中存在突变，其中ERBB2 S310F突变是胆囊癌的显著突变。以往对ERBB2突变的检测主要以全外显子测序为主，在临床病理诊断中并不方便。

发明内容

针对现有检测中的不足，本发明的目的是提供一种ERBB2 S310F突变的抗体在制备诊断检测胆囊癌中的应用。

本课题组前期与上海仁济医院课题组合作通过对胆囊癌样本进行全外显子组测序，证实ERBB2 S310F突变是胆囊癌的显著突变，并且ERBB2突变在引起胆囊癌PD-L1表达升高，促进胆囊癌的免疫逃逸中发挥重要作用。而目前对ERBB2 S310F突变并没有特意的抗体进行检测。为此，根据免疫学抗原抗体的特异反应的原理及抗体制备过程，预制备特异识别ERBB2 S310F突变的抗体，用于临床病理诊断。

为达到上述目的，本发明的解决方案是：

第一方面，本发明提供了一种ERBB2 S310F突变的抗体在制备诊断检测胆囊癌中的应用。

进一步地，ERBB2 S310F突变引起胆囊癌中PD-L1表达升高。

进一步地，抗体特异性识别人的胆囊癌中ERBB2 S310F突变。

进一步地，抗体进行免疫组织化学检测。

第二方面，本发明提供了一种上述的ERBB2 S310F突变的抗体在制备检测胆囊癌试剂盒中的应用。该试剂盒还包括免疫组化检测相关试剂，包括免疫组化DAB显示液(50*)，DAB显示液稀释液和免疫组化用兔二抗。

第三方面，本发明提供了一种上述的ERBB2 S310F突变的抗体的制备方法，其包括：

ERBB2氨基酸序列(mRNA序列为NM_004448.3，氨基酸序列为NP_004439.2)中第310位野生型的丝氨酸(S)突变为苯丙氨酸(F)，然后免疫兔子，收集兔子血清经过纯化，得到ERBB2 S310F突变的抗体。

由于采用上述方案，本发明的有益效果是：

之前对ERBB2 S310F突变的检测主要通过外显子组测序，这样需要消耗的时间和费用较多，不利于临床开展对ERBB2 S310F突变的检测。同时病理诊断检测较为便捷，也是肿瘤诊断的金标准，本发明依据ERBB2 S310F突变多肽制备的抗体可以进行免疫组织化学的检测，并用于胆囊癌的临床病理检测。

附图说明

图1为本发明的一代测序检测胆囊癌样本中ERBB2基因图。

图2为本发明的免疫组化分析制备的抗体对野生型ERBB2和S310F突变的ERBB2的特异性图。

图3为本发明的抗体检测野生型ERBB2和S310F突变的ERBB2胆囊癌示意图。