[发明专利]水稻基因OsROHAN在提高植物耐铵毒和氮素利用效率中的应用在审
| 申请号: | 202211019948.2 | 申请日: | 2022-08-24 |
| 公开(公告)号: | CN116023452A | 公开(公告)日: | 2023-04-28 |
| 发明(设计)人: | 宣伟;谢远明;徐国华;宋青林 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
| 主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 刘妍妍 |
| 地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 水稻 基因 osrohan 提高 植物 耐铵毒 氮素 利用 效率 中的 应用 | ||
1.水稻基因OsROHAN在提高植物耐铵毒和氮素利用效率中的应用,其特征在于,所述水稻基因OsROHAN的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述水稻基因OsROHAN编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述植物为禾本科植物。
3.一种对铵态氮敏感的突变体,其特征在于,所述突变体具有核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示的基因。
4.根据权利要求3所述的突变体的鉴定方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
步骤1、制备突变体库;
步骤2、将所述突变体库中的每个单株取数颗发芽;
步骤3、在铵态氮溶液中处理,观察根生长抑制情况,挑选出候选的植株繁种;
步骤4、候选突变体种子收获后,通过测量比较铵态氮溶液处理前后的相对根伸长情况,挑选出对铵态氮敏感突变体。
5.一种培育耐铵毒植物的方法,其特征在于,将如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列OsROHAN过量表达导入目的植物。
6.根据权利要求5所述的培育耐铵毒植物的方法,其特征在于,过量表达OsROHAN的方法包括以下步骤:
步骤1、在OsROHAN基因上设计引物序列;
步骤2、采用Gateway连接方法,导入到表达载体里面;
步骤3、将测序正确的质粒转化农杆菌;
步骤4、将培养后的所述农杆菌用感菌液制成菌浮液;
步骤5、用所述菌浮液侵染所述目的植物的愈伤组织,并置于共培养基上进行暗培养;
步骤6、在选择培养基上对所述愈伤组织进行筛选,并在分化培养基上培养至分化成苗。
7.根据权利要求6所述的培育耐铵毒植物的方法,其特征在于,扩增引物序列如SEQ IDNO:3~6所示。
8.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤4中,用含200μM乙酰丁香酮的AAM感菌液制备所述菌浮液。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述选择培养基含头孢拉定和潮霉素,筛选次数为3次。
10.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述目的植物为水稻。
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