[发明专利]一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法

权利要求书

1.一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液，其特征在于，所述染色液包括染色液Ⅰ、染色液Ⅱ、和分化液，所述染色液的使用顺序为先使用染色液Ⅰ，再使用分化液，最后使用染色液Ⅱ；

所述染色液Ⅰ按重量份计，包括以下组分：酸性复红0.1～2份、丽春红0.1～4份、橘黄G0.1～3份、0.1～0.25％醋酸溶液200～500份；

所述染色液Ⅱ按重量份计，包括以下组分：亮绿0.1～1份、0.1～0.25％醋酸溶液50～300份；

所述分化液为3～8％磷钨酸溶液。

2.根据权利要求1所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液，其特征在于，所述染色液Ⅰ按重量份计，包括以下组分：酸性复红1份、丽春红2份、橘黄G 2份、0.2％醋酸溶液300份。

3.根据权利要求1所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液，其特征在于，所述染色液Ⅱ按重量份计，包括以下组分：亮绿0.5份、0.2％醋酸溶液150份。

4.根据权利要求1所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液，其特征在于，所述分化液为5％磷钨酸溶液。

5.一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将切片脱蜡至水，使用权利要求1所述的染色液Ⅰ进行染色0.2～5分钟；

S2、清洗切片上多余的染色液Ⅰ，再使用权利要求1所述的分化液进行分化5～15分钟，再清洗多余分化液；

S3、使用权利要求1所述的染色液Ⅱ进行染色8～30分钟；

S4、清洗后脱水、透明处理后进行封片即可。

6.根据权利要求5所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，步骤S2、S4中，所述清洗使用的溶液为：醋酸溶液。

7.根据权利要求5所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，步骤S2、S4中，所述清洗的次数为两次。

8.根据权利要求6所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，步骤S2、S4中，所述醋酸溶液浓度为0.2％。

9.根据权利要求5所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，步骤S4中，所述脱水的方法为使用无水乙醇浸泡进行脱水；

和/或，步骤S4中，所述透明处理的方法为使用二甲苯、生物制片透明剂和氯仿中的一种试剂进行透明处理；

和/或，步骤S4中，所述封片的方法为使用中性树胶进行封片。

10.根据权利要求5所述的一种用于Ⅱ型肺泡细胞的染色液和原位特异性标识方法，其特征在于，步骤S1中，所述切片使用前由弱酸性固定液或中性固定液固定。