[发明专利]一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒

说明书

本发明涉及一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒，属于胶体金制备技术领域，一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；（2）加热至130‑150℃后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；（3）调至100℃，持续反应1min；（4）调至130‑150℃，持续反应3min；（5）调至90℃，持续反应7min；本发明是基于传统的柠檬酸三钠还原法上，通过控制不同反应温度，进而控制胶体金的成核过程与速度，最终制备出粒径大且均一的胶体金溶液，其所呈现出的产品检测灵敏度高、显色强度好、特异性好。

技术领域

本发明属于胶体金制备技术领域，具体涉及一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒。

背景技术

乙型肝炎病毒简称乙肝病毒，是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科(hepadnavividae)。

乙型肝炎病毒表面抗体一般在机体感染HBV后或接种乙肝疫苗后出现，对乙型肝炎病毒具有保护性免疫，被称为是一种保护性抗体。

目前，乙型肝炎病毒表面抗体常用乙肝表面抗体检测试剂盒来进行检查，乙肝表面抗体检测试剂盒的制备过程中需要进行金标垫的制备，而金标垫的制备过程中会使用胶体金，胶体金是氯金酸在某种还原剂作用下，形成的一定大小金颗粒；该金颗粒通过静电作用维系成一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，称为胶体金。

目前胶体金的制备方法一般采用还原法，其中白磷还原法可合成粒径3nm左右的金颗粒；抗坏血酸还原法可合成粒径10nm左右的金颗粒；硼氢化钠还原法可合成粒径3-20nm左右的金颗粒；柠檬酸钠还原法可合成粒径5-200nm左右的金颗粒。

不同粒径胶体金可直接影响产品的显色强度、灵敏度、特异性等性能。同等条件下，胶体金粒径越大，形状越不规则，制备难度越高，批间差越大，但同时显色强度越强，灵敏度越高，特异性越差。因此，制备出形状规则、性能良好的高质量胶体金是金免疫技术的基础与根本。

发明内容

针对上述困难，本发明要解决的技术问题是，提供一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，通过该方法可以制备出粒径大且形状规则的胶体金，同时可以提升产品显色强度和灵敏度，且特异性符合要求；

还提供一种乙肝表面抗体检测试剂条，检测灵敏度高，显色强度好；

还提供一种乙肝表面抗体检测试剂盒，使用便捷，操作简单。

为了解决以上问题，本发明采用的技术方案如下：一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，包括以下步骤：

（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；

（2）加热至130-150℃后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；

（3）调至100℃，持续反应1min；

（4）调至130-150℃，持续反应3min；

（5）调至90℃，持续反应7min，结束反应过程；

（6）恢复至室温后，避光置于2-8℃备用；

步骤（1）中，氯金酸溶液配制方法为：取1g氯金酸溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2-8℃避光保存；

步骤（2）中，柠檬酸三钠溶液配制方法为：取2g柠檬酸三钠溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2-8℃保存。

步骤（2）中，加热至140℃。

步骤（4）中，调至140℃。