[发明专利]一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的发酵工艺及其专用菌

权利要求书

1.一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌，其特征在于，所述菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus sp.)N-2，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M2022623，保藏日期为2022年05月13日。

2.如权利要求1所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌，其特征在于，所述的专用菌，其筛菌方法包括以下步骤：

(1)分离纯化：取自然发酵的油茶饼，加入无菌水，于37℃、150r/min振荡30min，静置，进行梯度稀释后，将菌悬液于LB、NA及PDA固体培养基上涂布，置37℃培养箱中培养48h；分离挑选单菌落，在平板上进行4次划线纯化，编号后存于固体斜面培养基中，倒30％甘油保存于-20℃冰箱中；

(2)初筛：从斜面上挑取一环接种于固体培养基中进行活化，重复两次后挑选单个菌落于相应液体培养基上，于37℃，150r/min震荡培养48h后作为种子液，在添加10％茶皂素的平板上稀释，并在37℃的倒置培养48小时，进行菌落计数，各菌株分别重复三次，取平均值；选取活菌数高于10⁷cfu/mL的菌株进行复筛；

(3)复筛：将初筛得到的菌株培养48h得到种子液，按10％的接种量接入灭完菌的含水量为80％的油茶饼粕中，37℃发酵48h，结束后取出测定其茶皂素降解率，3个平行,筛选得到枯草芽孢杆菌N-2。

3.如权利要求2所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌，其特征在于，所述步骤(1)的菌悬液，稀释度为10^-2～10^-4。

4.如权利要求1所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌在降解油茶饼粕中茶皂素的应用。

5.如权利要求4所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌在降解油茶饼粕中茶皂素的应用，其特征在于，包括以下步骤：

接种活化后的枯草芽孢杆菌N-2于对应的NA液体培养基中培养22个小时，将N-2种子液接种到发酵培养基中进行发酵，在发酵前让水与油茶饼粕充分混合，12h翻料一次，整个过程无需光照。

6.如权利要求5所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌在降解油茶饼粕中茶皂素的应用，其特征在于，枯草芽孢杆菌N-2种子液的接种量为6-12％。

7.如权利要求5所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌在降解油茶饼粕中茶皂素的应用，其特征在于，所述的发酵温度为31-37℃，发酵时间为48-108h。

8.如权利要求5所述的一种快速降解油茶冷榨饼粕茶皂素的专用菌在降解油茶饼粕中茶皂素的应用，其特征在于，所述的发酵培养基是由水与油茶饼粕组成，其中初始含水量为80-100％。