[发明专利]一种稳定的不饱和铁结合力测定试剂盒

说明书

本发明公开了一种稳定的不饱和铁结合力测定试剂盒由以下成分组成，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；试剂R1包含以下组分：缓冲液、氯化铁、碳酸氢钠碳酸钠、曲拉通‑100、Fe³⁺稳定剂、叠氮钠；试剂R2包含以下组分：甘氨酸、抗坏血酸、呋喃三嗪二钠盐、稳定剂、Pc300。本发明制备的不饱和铁结合力测定试剂稳定性好、准确度高、重复性好、分析灵敏度高，37℃可保存两周，明显优于市售的同类型产品。

技术领域

本发明涉及生化检测技术领域，特别是涉及一种稳定的不饱和铁结合力测定试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

铁是人体最丰富的必须微量元素之一，是合成红细胞中血红蛋白的主要原料，广泛参与人体内的代谢过程。存在于正常成人体内的铁平均3-4.5g左右，全身所有的铁约70％存在于血红蛋白中，少量存在于肌红蛋白中，而各种酶和血浆中运输状态的铁，仅占全身铁的极小部分，缺铁或含铁过多都会引发各种疾病。转铁蛋白又名运铁蛋白(transferrin，TRF， siderophilin)是血浆中主要的含铁蛋白质，负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁，以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。血清中只有三分之一的转铁蛋白与铁结合，其余三分之二未结合，转铁蛋白这种潜在的结合铁的能力称为不饱和铁结合力UIBC(Unsaturated Iron Binding Capacity)，能结合的最大铁量称为总铁结合力 TIBC(Total Iron Binding Capacity)，等于血清铁与不饱和铁结合力之和。

血清不饱和铁结合力的测定方法主要有原子吸收光谱法电化学法和直接比色法。原子吸收法与电化学法虽样品用量少，分析时间短，但因需要专门的测试仪器，且价格昂贵，应用范围有限，目前在临床实验室广泛使用的是比色法。目前血清铁和不饱和铁结合力检测试剂盒，都可以在自动生化仪上进行快速测定。不饱和铁结合力测定原理：向血清样本中加入含过量铁离子的碱性缓冲液，使未与铁结合的转铁蛋白全部与铁离子结合，剩余的铁离子在还原剂、显色剂作用下生成有色物质，在特定波长下测定吸光度，计算缓冲液中铁离子的减少量即为血清的不饱和铁结合力，而由不饱和铁结合力加上血清铁计算得到总铁结合力。但是由于铁离子在碱性条件下不容易稳定存在，Fe³⁺容易和OH^—结合，以及还原剂容易被氧化变质，不饱和铁结合力测定试剂存在重复性不好、稳定性差等缺点。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种稳定的不饱和铁结合力测定试剂盒，该试剂盒是稳定性强、准确度高、重复性好、灵敏度高的液体试剂盒。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种稳定的不饱和铁结合力测定试剂盒由以下成分组成，试剂盒含有试剂R1和试剂 R2；

试剂R1包含以下组分：

试剂R2包含以下组分：

其中，所述试剂R1中的的缓冲液为三(羟甲基)甲基甘氨酸(tricine)缓冲液。

所述试剂R1中的Fe³⁺稳定剂由L-酪氨酸、羟甲基磺酸钠和Pluronic F68组成，且质量比为1-2：2-3:3-5。

所述试剂R2中的稳定剂由三(2-羧乙基)膦盐酸盐和磺丁基-β-环糊精组成，且质量比为 1-3：3-4。

本发明有益效果：

1、本发明试剂R1采用三(羟甲基)甲基甘氨酸缓冲液，且提高了三(羟甲基)甲基甘氨酸的浓度，有利于试剂R1中Fe³⁺的稳定存在，在试剂1与血清样本混合后，Fe³⁺和转铁蛋白完全结合，加入R2后，剩余Fe³⁺和fenene结合，提高试剂准确度和分析灵敏度。