[发明专利]一株贝莱斯芽孢杆菌GSSN及其在防治松材线虫中的应用

说明书

本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌GSSN及其在防治松材线虫中的应用，属于生物技术领域。本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)GSSN，其于2022年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24849。还公开贝莱斯芽孢杆菌GSSN无菌发酵液以及包含贝莱斯芽孢杆菌GSSN和/或其代谢产物的微生物菌剂在抑杀松材线虫、拮抗松材线虫伴生真菌方面来防治松材线虫病中的应用。本发明公开的贝莱斯芽孢杆菌GSSN及其代谢产物对松材线虫及其伴生真菌拮抗作用明显，为松材线虫病的防治提供新的生防菌类型，对植物线虫的防治具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一株贝莱斯芽孢杆菌GSSN及其在防治松材线虫中的应用。

背景技术

松材线虫病(pine wilt disease)，是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus(SteinerBubrer)Nickle)引起的一种松树毁灭性病害。松材线虫病是一个复杂的病害系统，发病因素复杂，包括松材线虫、寄主松树、媒介昆虫、真菌、细菌、人为活动和环境等。松材线虫病传播迅速，初期发病部位隐蔽，存在潜伏侵染的现象，导致该病治理难度大，至今未能得到完全控制和根除。自1982年中国南京发现以来，松材线虫病已遍及19个省的731个县，共造成10亿多棵松树死亡，直接和间接的经济、生态损失已达数千亿元(国家林业和草原局2022年第6号公告)。

松材线虫的生活史中，有一个重要的食菌阶段。在这个阶段，松材线虫可以通过取食多种真菌来维持自身的生长和种群的繁殖。目前已知可促进松材线虫生长和繁殖的真菌有很多种，同时也有少量对松材线虫不利的真菌。有研究表明，伴生真菌Sporothrix sp.1与从木质部提取的DAA联合接种至有松材线虫的木段中，可使松材线虫产生大量的后代，且雌雄比差异较大，发育速度较快。除此之外，松材线虫也可以产生线虫蛔甙(Ascarosides)物质促进真菌的生长和产孢，从而增加线虫的种群数量，提高媒介昆虫携带数量，加重病害的发生。

目前，针对松材线虫病，中国主要从病原和传播媒介两个方面，以预防为主，结合物理、化学和生物防治进行综合治理，但都没能完全控制和消除疫区。近年来，随着人们的环保意识逐步提高，生物防治越来越受到重视。目前，针对松材线虫病的生物防治可大致分为以下几方面：

(1)针对媒介昆虫：松墨天牛是松材线虫的主要传播媒介，松墨天牛的防治一方面通过释放生物信息素对其进行诱杀，另一方面通过释放松墨天牛天敌进行捕杀。但目前存在的问题是，释放生物信息素无法回答防治后林间剩余天牛数量，目前，利用病原真菌和昆虫天敌防治松材线虫应用较多。病原真菌包括绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、白僵菌(Beauveria bassiana)等。寄生天敌主要有花绒寄甲(Dastarcus helophoroides)、管氏肿腿蜂(Scleroderma guani)、川硬皮肿腿峰(Scleroderma sichuanensis)等。但这些方法受林间的生物和非生物因素影响较大，防治效果不具稳定性和确定性。

(2)针对病原线虫：目前在防治松材线虫应用最多的是生物杀菌剂阿维菌素、甲维盐等注干药剂，注药一次能防2-3年。但是这种树干注射剂价格高，注射全程由人工完成，因此仍然成本较高，通常只能应用在重要区域或古树名木上。目前，中国也开始做松树抗松材线虫病的抗性育种，但这是一条长期的道路，无法在短期内实现。

因此，许多国家的研究者们也都在努力寻找防治植物线虫的新途径。开发具有高效、低毒的生物防治剂已经迫在眉睫，利用有益微生物防治线虫成为了发展生物防治剂的重要途径。