[发明专利]恶性表型大细胞肺癌细胞株及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及恶性表型大细胞肺癌细胞株及其应用。本发明提供恶性表型大细胞肺癌细胞株，所述的细胞株包含：801D‑A10、801D‑F4、801D‑H10、801D‑E6、801D‑F10和801D‑F11中的任意一种。本发明建立的6种人大细胞肺癌细胞株，都可以成功传代至60代，能够稳定传代，且生长迅速。通过体内外实验证实801D‑A10、801D‑F4和801D‑H10细胞株的增殖和迁移侵袭能力强，通过体内外实验证实801D‑E6、801D‑F10和801D‑F11细胞株的增殖和迁移侵袭能力弱。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及恶性表型大细胞肺癌细胞株及其应用。

背景技术

肺癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一。近50年来其发病率和死亡率均明显增加，男性发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明确。而且50％以上的肺癌患者在确诊时已属晚期，而晚期肺癌患者的预后极差，5年生存率仅5％。预计未来20年，肺癌将成为我国社会负担和经济负担最重的疾病。尽管近年来靶向治疗和免疫治疗，显著延长了患者的生存时间，但靶向治疗耐药的时常发生和免疫治疗的不良反应使肺癌的治疗面临困境，因此，探讨肺癌发生发展的分子机制及分子治疗靶点仍然是迫切亟待解决的问题。

细胞是生物体结构和功能的基本单位，是生物体个体发育和系统发育的基础。肿瘤细胞具有无限增殖、失去接触抑制、细胞间粘着性减弱等特点，体外培养和建立人肺癌细胞系或细胞株对于研究肺癌癌变、侵袭转移、多药耐药的分子机理、生物学特征以及开发抗肺癌新药等均有十分重要的理论和临床意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种容易培养，传代稳定，易于推广，可以在传统的细胞生物学实验室使用的恶性表型大细胞肺癌细胞株。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

第一方面，本发明提供恶性表型大细胞肺癌细胞株，所述的细胞株包含：

保藏号为CGMCC NO:45140的801D-A10；

保藏号为CGMCC NO:45141的801D-F4；

保藏号为CGMCC NO:45139的801D-H10；

保藏号为CGMCC NO:45138的801D-E6；

保藏号为CGMCC NO:45142的801D-F10

和保藏号为CGMCC NO:45143的801D-F11中的任意一种。

在一种具体实施方式中，所述的细胞株中801D-A10、801D-F4和801D-H10细胞株增殖和迁移侵袭能力强，801D-E6、801D-F10和801D-F11细胞株增殖和迁移侵袭能力弱。

第二方面，本发明提供恶性表型大细胞肺癌细胞株的获取方法，所述的方法包括：

将人巨细胞性肺癌细胞801D接种在Transwell小室上层，癌细胞培养后被聚碳酸酯膜分离为3种，分别为：依附于聚碳酸酯膜贴壁生长的癌细胞801D膜、穿过聚碳酸酯膜没有贴壁生长落在孔板底的癌细胞801D下和未穿过聚碳酸酯膜的癌细胞801D上；

3种细胞分别培养，消化、重悬后单细胞培养并扩增，筛选得到801D-A10、801D-F4、801D-H10、801D-E6、801D-F10和801D-F11单克隆。

在一种具体实施方式中，所述的细胞株中：