[发明专利]一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝胶及其应用

权利要求书

1.一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝胶，其特征在于，其制备包括如下步骤：

(1)将大豆分离蛋白和海藻酸钠进行干混；

(2)将TG酶溶于去离子水中；

(3)将CaCl₂溶于去离子水中；

(4)将步骤(2)中所得的TG酶溶液加入到步骤(1)干混后的大豆分离蛋白和海藻酸钠中，充分搅拌均匀，得胶体备用；

(5)将步骤(4)中所得的胶体进行装模，然后冷冻干燥；

(6)将步骤(5)中冻干后的胶体浸泡到步骤(3)中得到的CaCl₂溶液中；

(7)将步骤(6)中得到的胶体进行冷冻干燥，得到三维支架水凝胶；

(8)将步骤(7)中得到的三维支架水凝胶结合细胞进行培养。

2.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(1)中所述的大豆分离蛋白和海藻酸钠的重量比未1:1。

3.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(2)中所述的TG酶的酶活力为40U/g。

4.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(3)中所述的CaCl₂溶液的浓度为0.1mol/L。

5.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(4)中所述的搅拌速度为60rpm。

6.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(5)和步骤(7)中所述的冷冻干燥均为真空冷冻干燥，冻干条件为-60℃，48h。

7.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(6)中所述的浸泡时长为6h。

8.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(8)中所述的细胞培养的培养板为超低吸附培养板。

9.根据权利要求1所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，步骤(8)中所述的细胞为牛-Myoblast-P6。

10.根据权利要求9所述一种用于细胞培养肉二次冻干法制备的可食用三维支架水凝，其特征在于，所述的牛-Myoblast-P6培养条件为37℃、5％的CO₂培养箱，换液时间为每隔48h进行换液，培养时间为14d。