[发明专利]一种稳定性提高的人源化单克隆抗体及其应用

说明书

本发明提供了稳定性提高的、特异性结合人ACE2的人源化单克隆抗体或其抗原结合片段、其相关产品及其制备方法和用途。本发明的抗人ACE2的人源化单克隆抗体或其抗原结合片段不仅能以高亲和力与人ACE2受体特异性结合，还具有较高的稳定性和较好的成药性，有望成为以ACE2作为受体的冠状病毒感染的治疗性抗体药物。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种稳定性提高的、特异性结合人ACE2的人源化单克隆抗体或其抗原结合片段、其相关产品及其制备方法和用途。

背景技术

冠状病毒在系统分类上属套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具囊膜、基因组为线性单股正链的RNA病毒，是自然界广泛存在的一大类病毒。冠状病毒仅感染脊椎动物，如人、鼠、猪、猫、犬、狼、鸡、牛、禽类。

目前已知可以感染人类的冠状病毒有7种，分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV(引发重症急性呼吸综合征)、MERS-CoV(引发中东呼吸综合征)和新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。在这些冠状病毒中，SARS-CoV、SARS-CoV-2和HCoV-NL63都是以血管紧张素转化酶2(ACE2)作为受体，利用其表面主要的糖基化刺突蛋白(S蛋白)的RBD区与宿主细胞表面受体ACE2结合，完成感染宿主细胞的生物学过程，从而感染人源宿主细胞和人的。

抗体，尤其是阻断型抗体，可通过结合宿主细胞的受体蛋白而阻断病毒与细胞受体的结合，从而阻断病毒感染，达到阻断病毒入侵宿主细胞的过程，实现预防及治疗效果。因此，靶向人ACE2受体并且阻断其与SARS-CoV、SARS-CoV-2和HCoV-NL63等冠状病毒的S蛋白RBD结合的抗体，极有可能成为抑制这些病毒感染的有效抗体。

抗体类蛋白质药物的天然稳定性显著低于小分子化合物，由人源化改造引入的氨基酸突变也可能影响抗体分子的理化特性，使抗体分子在生产、储存、给药过程中出现不希望看到的化学修饰、断裂和聚集等现象，影响抗体药物的产率、活性，高分子聚集体还会造成免疫原性增强等方面的药物安全性问题。

因此，开发具有较高的稳定性和较好的成药性的、针对冠状病毒的治疗性抗体药物具有潜在的临床应用价值与前景。

发明内容

发明目的

本发明的目的在于提供一种不仅具有较高的抗原结合活性，还具有较高的稳定性、较好的成药性的、特异性结合人ACE2的人源化单克隆抗体或其抗原结合片段，其相关产品，以及其制备方法和用途。

解决方案

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

第一方面，本发明提供了特异性结合人ACE2的人源化单克隆抗体或其抗原结合片段，所述人源化单克隆抗体或其抗原结合片段包含选自以下的重链可变区和轻链可变区组：

(1)重链可变区，其包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；和轻链可变区，其包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或

(2)重链可变区，其包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:7所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；和轻链可变区，其包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。

在优选的实施方案(I)中：