[发明专利]一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基和方法

说明书

本发明公开了一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基和方法，所述以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基包括：在MS培养基上添加了6BA1mg/L、NAA0.2mg/L、TDZ0.1mg/L和GA5mg/L。本申请通过实验发现合适的TDZ搭配GA(在MS培养基上添加了6BA1mg/L、NAA0.2mg/L、TDZ0.1mg/L和GA5mg/L)可以有效地使茎段快速发育产生愈伤并分化出不定芽，愈伤率达到了83％。

技术领域

本发明涉及苗木无性繁殖技术领域，特别涉及一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基和方法。

背景技术

贝母含有多种生物碱，主要含甾体生物碱,并且总生物碱含量要高于川贝母、浙贝母,其含有的湖贝甲素是湖北贝母的特征性成分。截至目前，贝母已成为贝母市场中的第二大主流贝母商品。贝母鳞茎愈伤组织诱导和分化的初步探究技术大都已经趋于成熟，但是人工栽培技术终究还是存在耗种量大，生长周期长，产量低，加之病虫害严重,损种烂种严重,管理不当甚至会绝产绝收，这已经严重限制了湖北贝母的产业规模化发展。

目前湖北贝母在市场上的需求超过了本身的产量，很多中药入药都要用到贝母，并且随着中医传入国外，拓宽了市场，使得贝母这一味药材需求直线上升，传统的人工栽培技术已经无法满足现有的消费群体，所以如何建立高效、高产的工厂化栽培体系，是目前的技术难题。而组培中技术瓶颈就是如何开发一种诱导率高的愈伤组织诱导培养基和方法。

因此，有必要开发一种诱导率高的愈伤组织诱导培养基和方法。

发明内容

本发明目的是提供一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养的方法，该以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养的方法，愈伤率达到了83％。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

在本发明的第一方面，提供了一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基，所述以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基包括：在MS培养基上添加了6BA1mg/L、NAA0.2mg/L、TDZ 0.1mg/L和GA5mg/L。

进一步地，所述MS培养基中糖30g/L+琼脂5mg/L+抑菌剂，所述抑菌剂为：0.2g/L百菌清、0.2g/L链霉素和0.1g/L多菌灵。

在本发明的第二方面，提供了一种以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养的方法，所述方法采用所述的以贝母茎段为外植体的愈伤组织诱导培养基，包括：

取经炼苗生长后的贝母植株的茎段，经灭菌处理，获得外植体；

将所述外植体置于贝母愈伤组织诱导培养基中进行诱导培养，获得愈伤组织。

进一步地，所述方法还包括：将所述愈伤组织切成块置于贝母增殖分化培养基中进行增殖分化培养，获得分化出不定芽的外植体；

将所述分化出不定芽的外植体置于贝母生根培养基中进行生根培养，获得生根苗；

将所述生根苗进行炼苗移栽。

进一步地，所述取经炼苗生长后的贝母植株的茎段，经灭菌处理，获得外植体，包括：

采集经炼苗生长后的贝母植株的茎段，于流水下冲洗，后浸泡于0.2％多菌灵溶液中并置于摇床上振荡，后用清水冲洗以洗去多菌灵溶液，获得已处理的外植体；

于超净工作台上，将所述已处理的外植体放入广口瓶中，加入10％的次氯酸钠摇晃4-8min，后用酒精冲洗40-50s，再用无菌水冲洗去酒精。

进一步地，所述诱导培养的条件为：培养温度为23-27℃，培养时间为15-30d。

本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：