[发明专利]一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）及其应用。该多粘类芽孢杆菌JWYB12现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No：24850。本发明经过16S rDNA菌种鉴定确定JWYB12为多粘类芽孢杆菌。其对马拉色菌的抑制作用明显，具有安全性高、作用明显、成本较低、生产较快、绿色环保等优点。

技术领域

本发明涉及医药与日化领域，具体涉及一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌及其应用。

背景技术

马拉色菌是一种条件致病菌，在人群皮肤毛发样品中可以检出，有些未展现危害，但当某些内外条件改变时会引起马拉色菌过度繁殖，导致花斑癣、马拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、特征性皮炎等皮肤疾病，严重影响人们的生活质量，同时给人们造成精神困扰。因此寻找一种能够抑制马拉色菌过度繁殖的药物刻不容缓。酮康唑、伊曲康唑等唑类抗真菌剂曾因效果明显而备受患者们的青睐，但随着时间的推移，人们发现此类药物存在副作用大、容易复发等问题，一些新型的抗马拉色菌制剂开发也在不断探索中(朱敏.中草药及其单体抗马拉色菌作用的研究[D].复旦大学,2003)。

作为类芽孢杆菌属的模式菌，多粘类芽孢杆菌具有革兰氏染色呈阳性、好氧或兼性厌氧、能产生芽孢、抗逆性强等特点(和林松,陶玲庆,韦露萍,等.多粘类芽孢杆菌胞外多糖的功能研究进展[J].安徽农学通报,2022,28(06):41-45.)，在自然界中广泛存在。近些年来多粘类芽孢杆菌的研究主要集中于以下两个方面：一是多粘类芽孢杆菌本身在生物防治方面上的应用，抑制植物病原菌贮藏腐败菌，例如防治小麦赤霉病、燕麦根腐病和葡萄霜霉病等；二是其生产的胞外多糖、抗菌肽为代表的代谢产物所具有的生理功能，包括抑菌特性、抗氧化性、免疫活性和抗肿瘤活性等。综合前人研究，尚未发现多粘类芽孢杆菌在抑制马拉色菌方面的报道。

近期Nature子刊中的一篇文章介绍一种新的皮肤病治疗模式，该模式认为特征性皮炎等皮肤疾病处于菌群失调的状态，应该在皮肤上重新接种有益微生物去治疗，而不是使用药物(Schmidt C.Out of your skin[J].Nature Biotechnology,2020,38(4):392-397.)。该治疗模式受到了较大的关注，不少公司或科研团队纷纷投入其中，例如美国的MatriSys Biosciences公司。该公司声称其开发的人葡萄球菌制剂可以通过抑制金黄色葡萄球菌的生长用于治疗特征性皮炎。目前皮肤微生态研究是化妆品公司为主导。多家化妆品公司瞄准微生态化妆品市场，将皮肤微生态作为研发的焦点，以益生菌、益生元、后生元等作为研究对象，希望开发出具有显著护肤效果的洗化产品。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌，使其能作为益生菌调节皮肤微生态，从而为治疗或缓解某些皮肤问题提供新方案。

本发明公开了一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌JWYB12，其经过16S rDNA菌种鉴定确定为多粘类芽孢杆菌，现保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No：24850，保藏日期为2022年5月9日。体外抑菌实验显示多粘类芽孢杆菌对马拉色菌的抑制作用明显。

本发明进一步提供了一种基于上述多粘类芽孢杆菌的发酵方法，其包括如下步骤：

1)将冻存的多粘类芽孢杆菌取出，于LB固体培养基上划线培养，置于28-37℃培养箱中16-24h；划取固体培养基上的单菌落，于发酵液体培养基中，28-37℃、150-200rpm摇床培养16-24h后完成活化；

2)取活化好的多粘类芽孢杆菌，按照1-3％的接种比例接种到发酵液体培养基中，28-37℃、150-200rpm摇床培养36-48h后取出；得到发酵液。

进一步地，所涉及到的多粘类芽孢杆菌的发酵液体培养基的配方如下：蔗糖50g/L，胰蛋白胨5g/L，酵母浸粉1g/L，磷酸氢二钠3g/L，115℃高温灭菌20min。