[发明专利]一种硫酸粘菌素含量的检测方法

说明书

本发明提供了一种硫酸粘菌素含量的检测方法，包括如下步骤：(1)精密称定硫酸粘菌素，用流动相稀释样品至一定浓度，过滤，取适量滤液进行高效液相色谱分析；(2)高效液相色谱条件：色谱柱：选用十八烷基硅胶为填充剂的色谱柱，型号与规格为ODS‑BP250*4.6，5μm；(3)配制标准品溶液并对标准品溶液进行高效液相色谱分析；(4)测定峰面积，计算样品的含量。本发明提供的一种硫酸粘菌素含量的检测方法，不同于抗生素效价法的操作繁琐，检测消耗的时间过长，通过高效液相色谱分析，操作简单、数据准确且检测用时少。

技术领域

本发明属于药物分析领域，更具体的是涉及一种硫酸粘菌素含量的检测方法。

背景技术

硫酸粘菌素(ColistinSulphate，又称硫酸粘杆菌素、硫酸抗敌素、克利斯汀(Colistin)、多粘菌素E(PolymyxinE)、抗敌素等,)分子式为C₅₂H₉₈N₁₆O₁₃·2H₂SO₄，分子量为1352。纯品为白色或类白色粉末，易溶于水。预混剂为浅褐色或褐色颗粒或粉末。,易溶于水,耐热,消化道不易吸收,排泄迅速,毒性小,无副作用,不易产生耐药性菌株,是最安全的畜禽促生长抗生素之一。硫酸粘菌素是碱性多肽类抗生素，主要用于防治敏感菌的感染和促进畜禽生长。硫酸粘菌素可以与细胞膜脂蛋白游离磷酸盐结合，使得细胞膜表面张力减小、通透性增加，导致胞浆外流，细胞死亡。硫酸粘菌素对革兰氏阴性菌(尤其大肠杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌和嗜血杆菌等)有强抑制作用，对革兰氏阳性菌(除金黄葡萄球菌和溶血性链球菌外) 和真菌无作用。硫酸粘菌素口服难以吸收，毒性较低，不易造成药物残留，不易产生耐药性。

目前《中华人名共和国兽药典》以及《中华人名共和国药典》中规定的硫酸粘菌的检测方法均为抗生素效价法，该方法存在的检测操作繁琐，检测耗时过长的特征，不适宜企业生产产品及时检测的要求。

发明内容

为解决现有技术的不足，现提供一种硫酸粘菌素含量的检测方法，包括如下步骤：

包括如下步骤：

S1、精密称定样品，用流动相稀释样品至一定浓度，过滤，取适量滤液进行高效液相色谱分析；

S2、高效液相色谱条件：色谱柱：选用十八烷基硅胶为填充剂的色谱柱，型号与规格为 ODS-BP250*4.6，5μm；

流动相：由无水硫酸钠和乙腈混合组成，加入酸性物质调节流动相PH至2-3；

流速：0.5-1.5ml/min；

紫外检测器波长：200nm-300nm；

进样体积：15-25μL；

S3、标准品溶液配制(精密称取对照品适量，用流动相西事成每1ml含硫酸粘菌素0.5mg 的溶液)，并对标准品溶液进行高效液相色谱分析；

S4、测定峰面积，计算样品的含量。

优选的，S2中流动相体积配比为无水硫酸钠：乙腈＝70：30。

优选的，S1中所述的一定浓度为含硫酸粘菌素0.5mg/ml。

优选的，S2中所述的无水硫酸钠的浓度为0.1mol/L。

优选的，S2中所述的紫外检测器波长为214nm，进样体积为20μL。

优选的，S2中所述的酸性物质为磷酸。

有益效果：

(1)区别于现有技术，本发明提供的一种硫酸粘菌素含量的检测方法，不同于抗生素效价法的操作繁琐，检测消耗的时间过长，通过高效液相色谱分析，操作简单、数据准确且检测用时少。