[发明专利]一种抗小鼠IgG1的山羊抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种抗小鼠IgG1的山羊抗体及其应用。该抗体至少具有重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3、轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3之一。该抗体可用于制备鼠IgG1二抗。本发明通过噬菌体展示技术获得了靶向小鼠IgG1的山羊抗体，该抗体能够以高亲和力特异性识别小鼠的IgG1，与小鼠IgG2a、IgG3有弱结合，且与Human IgG没有交叉反应，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及一种抗小鼠IgG1的山羊抗体及应用，属于生物技术领域。

技术背景

由小鼠作为第一来源的抗体被称为第一抗体，第二抗体是能和第一抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。二抗在间接酶联免疫、免疫层析等实验中发挥了巨大作用。传统二抗的制备是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白，具有制备周期长，操作繁琐的缺点。抗体库技术是一种将某种动物的所有抗体可变区基因克隆在质粒或噬菌体中表达，利用不同的抗原或抗体筛选出携带特异抗体基因的克隆，从而获得相应的特异性抗体的技术。抗体库技术不仅可以模拟动物免疫系统产生抗体的过程，还具有许多独特的优点，抗体库技术无需免疫，从理论上讲，10^～10的库容就可能包容所有的抗体。利用抗原或抗体即可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体，并能筛选到针对该物种自身抗原的抗体。

发明内容

本发明的主要目的是：提供一种抗小鼠IgG1，且与人IgG没有交叉的山羊抗体，同时还提供该抗体的应用。

本发明解决其技术问题的技术方案如下：

一种抗小鼠IgG1的山羊抗体，所述抗体选自以下任意一种：

i)所述抗小鼠IgG1的山羊抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2第31-35、50-64、98-112位氨基酸序列所示，轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4第24-39、55-61、94-102位氨基酸序列所示；

或ii)所述抗小鼠IgG1的山羊抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6第31-35、50-64、98-108位氨基酸序列所示，轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:8第24-39、55-61、94-102位氨基酸序列所示。

作为本发明的一种优选，所述的抗小鼠IgG1的山羊抗体的重链氨基酸序列如SEQID NO：2所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示；或重链氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示；轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。

编码本发明所述抗小鼠IgG1的山羊抗体的核酸。

作为本发明的一种优选，所述抗小鼠IgG1的山羊抗体的重链DNA序列如SEQ IDNO：1所示，轻链DNA序列如SEQ ID NO：3所示；或者重链DNA序列如SEQ ID NO：5所示，轻链DNA序列如SEQ ID NO：7所示。

本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本发明的所述抗体的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明的所述抗体的核苷酸序列75％或75％以上同一性的核苷酸，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。

这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发明的编码SEQ ID No.1所示的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。上述75％或75％以上同一性，可为75％、80％、85％、90％或95％以上的同一性。