[发明专利]一种防治柑橘溃疡病的枯草芽孢杆菌、菌剂及其应用

权利要求书

1.一种防治柑橘溃疡病的枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，保藏编号为CGMCC No.24778，保藏日期为2022年4月26日。

2.一种防治柑橘溃疡病的菌剂，其特征在于：所述菌剂为权利要求1所述枯草芽孢杆菌的发酵液，所述菌剂中，枯草芽孢杆菌的菌含量为112×10⁸ cfu/mL。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌的发酵液的制备方法包括菌株活化、种子液制备、发酵；所述发酵包括一级种子罐培养、二级种子罐培养、发酵罐培养。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于：所述菌株活化的方法为将枯草芽孢杆菌在LB固体培养基上进行三区划线，37℃培养24h，得到活化的菌株。

5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于：所述种子液制备的方法为从活化的菌株中挑取单菌落接种到150mL种子培养基中，在37℃、200转/min下，培养14h，得到种子液。

6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于：所述一级种子罐培养的方法为，按照体积比为10%的接种量，将种子液接入一级种子罐的种子培养基，控制温度为37℃，通风为0.8V/V.m，pH为7.5，转速为200转/min，培养时间为12h，得到一级种子培养物；所述二级种子罐培养的方法为，按照10%接种量，将一级种子培养物接种到二级种子罐的种子培养基中，控制温度为37℃、通风为0.8 V/V.m、pH为7.5、转速为100转/min、培养时间为12h，取样镜检菌体处于对数生长期，得到二级种子培养物；所述发酵罐培养，将二级种子培养物转至发酵罐中培养，控制温度为37℃， 0-6h的通风量为0.8V/V.m，6h后的通风量调至2V/V.m，pH为7.5，转速为100转/min，培养时间为32h。

7.根据权利要求6所述的菌剂，其特征在于：所述种子培养基和发酵罐内的发酵培养基，以质量百分比计，均由以下成分组成：麦芽糊精3%，豆粕粉6.5%，葡萄糖0.3%，七水硫酸镁0.1%，碳酸钙0.2%，磷酸氢二钠0.05%，硫酸锰0.02%，消泡剂0.15%，去离子水补足100%。

8.权利要求2所述菌剂的应用，其特征在于：所述菌剂用于预防和防治柑橘溃疡病。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：将菌剂用清水稀释至0.5亿/mL，得到菌剂稀释液，每亩叶面喷施菌剂稀释液50L。