[发明专利]一种蝉花孢梗束的快速培养方法

说明书

本发明涉及一种蝉花孢梗束的快速培养方法，属于生物制品的培养制备技术领域。操作步骤包括（1）蝉花（Cordyceps chanhua）菌种选择，所用蝉花菌种保藏在RCEF菌库，国际菌库号为WDCM1031，（2）制备一级固体菌种，得到一级固体菌种，（3）制备二级液体菌种，得到二级液体菌种，（4）蝉花孢梗束培养，将二级液体菌种接种到小麦固体培养基上培养；喷施专用添加剂培养，蝉花孢梗束的长度达到35～45mm，即可采收；所述专用添加剂由磷脂酰胆碱、核黄素、色酪半胱三肽、甲基吡啶甜菜碱和水配制成的水溶液。本发明的培养方法可将蝉花孢梗束生长时间从15～18天缩短到10～12天，节省50%以上培养时间；同时，使蝉花孢梗束生长均匀整齐，利于工厂化采收，提高生产效率。

技术领域

本发明属于生物制品的培养制备技术领域，具体涉及蝉花孢梗束快速培养的方法。

背景技术

蝉花( Cordyceps chanhua)为麦角菌科( Clavicipitaceae)、虫草属( Cordyceps)的真菌，有多个同物异名：蝉虫草（ Cordyceps cicadae） , 辛克莱蝉花（ Cordyceps sinclairii）, 辛克莱棒束孢（ Isaria sinclairii）, 蝉拟青霉（ Paecilomyces cicadae）和蝉棒束孢（  Isaria cicadae）。是蝉花真菌感染昆虫后长出孢梗束后的虫草复合体，蝉花是我国传统中药材，具有一千余年利用历史，具有重要经济价值，但是野生蝉花生产需要2年时间，同时受气候环境等多种因素影响，生产具有很大不确定性。目前，培养蝉花已实现人工培养，但培养过程中仍然有很多因素导致孢梗束诱发缓慢、生长参差不齐或产量较低。

本专利申请前期研究，通过比较蝉花不同生长阶段代谢差异，发现了在生长某些阶段添加本发明专用添加剂，可加快诱发蝉花孢梗束，并促进其生长，提高蝉花孢梗束生长速度。

发明内容

为了实现提高蝉花孢梗束生长速度、生长均匀整齐、利于工厂化采收，本发明提供一种蝉花孢梗束的快速培养方法。

一种蝉花孢梗束的快速培养方法，所用蝉花菌株保藏在虫生真菌研究中心菌库（RCEF菌库），其国际菌库保藏号为WDCM1031；操作步骤如下：（1）制备一级固体菌种，将蝉花（ Cordyceps chanhua）斜面菌种接种于平板固体培养基中培养，得到一级固体菌种；（2）制备二级液体菌种，将一级固体菌种接种于液体培养基中振荡培养，得到二级液体菌种；（3）蝉花孢梗束培养；

步骤（3）中，将二级液体菌种接种到小麦固体培养基上，接种量为每100g小麦培养基接种1～10ml液体菌种，温度22～29℃条件下，恒温培养7～10天；喷施专用添加剂，喷施量为培养基干重的0.05～0.15%，温度22～29℃条件下，恒温培养10～12天，蝉花孢梗束的长度达到35～45mm，即可采收；

所述专用添加剂由磷脂酰胆碱、核黄素、色酪半胱三肽和甲基吡啶甜菜碱按质量比1～3：1～3：3～1：3～1（w/w）混合均匀，得到混合物；取20g～100g混合物加水定溶到1000mL即得。

步骤（3）中，所述小麦固体培养基：将小麦在水中浸泡1～10小时；温度121℃条件下，灭菌15～25分钟，冷却得到。