[发明专利]一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体、制备方法及其应用

说明书

本发明提供了一种抗新冠病毒SARS‑CoV‑2突变株表面S2蛋白的单链抗体、制备方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。本发明的抗新冠病毒SARS‑CoV‑2突变株表面S2蛋白的单链抗体为HXLC‑031。单链抗体HXLC‑031与新冠病毒变异株S2蛋白具有较强的特异性结合能力，能够在蛋白和细胞水平上显著阻断新冠病毒S2蛋白与人ACE2的结合，并能阻止新冠病毒假病毒感染靶细胞，本发明的单链抗体HXLC‑031对SARS‑CoV‑2原始株WT、Beta突变株(B.1.351南非突变株)、Delta突变株(B.1.617.2印度突变株)以及Omicron突变株(B.1.1.529突变株)均有很好的中和活性，具有极大的开发潜力。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其是涉及一种抗新冠病毒SARS-CoV-2 突变株表面S2蛋白的单链抗体、制备方法及其应用。

背景技术

经过30年的发展，抗体药成为全球医药市场的重要组成部分。抗体药市场仍由肿瘤、自身免疫两大领域主导。随着人们对疾病了解的不断加深、抗体技术的不断进化，抗体药在心血管、神经系统疾病、通风、感染等并非传统的抗体药适应症领域也慢慢渗透。这是抗体药发展的新方向。随着技术的进步和免疫学基础研究的快速发展，抗体药的设计日益多样化，应用范围逐步扩大。

对世界影响较大的突变株先后分别有Alpha突变株(B.1.1.7英国突变株)、Beta突变株(B.1.351南非突变株)、 Delta突变株(B.1.617.2印度突变株)，以及2021年底新出现的Omicron突变株(B.1.1.529突变株)。然而，随着各种突变株的出现，研究发现，若干种针对SARS-CoV-2的中和抗体对突变株的中和效力大幅降低；当前已用于临床的针对SARS-CoV-2的疫苗也对其保护效力大大降低，进而可能造成已接种人群的二次感染。奥密克戎毒株最初之所以受到关注，主要是因为它携有大量基因突变，仅在其表面刺突蛋白上的变异就有大约32处，其中15处都是位于RBD 结构域。研究认为，一些变异可能会增强病毒的传染性和免疫逃逸能力。因此，开发一种针对冠状病毒变异株的中和抗体和疫苗已迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体、制备方法及其应用。本发明的单链抗体与新冠病毒突变株S2蛋白具有较强的特异性结合能力，能够在蛋白和细胞水平上显著阻断新冠病毒S2蛋白与人ACE2的结合，并能阻止新冠病毒假病毒感染靶细胞。本发明提供的诸多技术方案中的优选技术方案所能产生的诸多技术效果详见下文阐述。

为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供的提供了一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体为HXLC-031。

根据一种优选实施方式，所述单链抗体HXLC-031的基因序列包括重链序列和轻链序列，其中，所述重链序列包括序列为SEQ ID NO.1的重链CDR1序列、序列为SEQ ID NO.2的重链CDR2序列和序列为SEQ ID NO.3的重链CDR3序列，所述轻链序列包括序列为SEQ IDNO.4的轻链CDR1序列、序列为SEQ ID NO.5 的轻链CDR2序列和序列为SEQ ID NO.6的轻链CDR3序列。

其中，SEQ ID NO.1为：SGSSSNIGNNYVS。SEQ ID NO.2为：DNNKRPS。SEQ ID NO.3为GTWDSSLSAWV。SEQ ID NO.4为：SYYMH。SEQ ID NO.5为： IINPSGGSTSYAQKFQG。SEQ ID NO.6为DLERGLGY。

根据一种优选实施方式，所述单链抗体HXLC-031的重链序列具有与SEQ ID NO.7所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体HXLC-031的轻链序列具有与SEQ IDNO.8所示序列至少70％相同的基因序列。