[发明专利]一种用于检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针及其制备方法与应用。本发明利用3‑乙酰基诺蒎酮为原料与对羟基苯甲醛进行羟醛缩合反应，再与三氟化硼‑乙醚进行络合反应，最后和和丙烯酰氯进行酯化反应得到化合物3‑(3‑((4‑丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物。该络合物的THF‑PBS溶液中加入半胱氨酸后，在365nm紫外光照射下，溶液的荧光颜色由蓝色变为黄绿色，对半胱氨酸的检测极限达到2.1×10supgt;‑7/supgt;mol/L，响应时间为2min，可作为检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属精细有机合成技术领域，涉及一种用于检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

半胱氨酸是一种人体必需的氨基酸，在代谢、调节氧化还原稳态、蛋白质合成、解毒、细胞信号转导等方面发挥重要作用。然而，体内半胱氨酸水平异常会引起特定的疾病，如神经毒性、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化、帕金森病等。因此，开发一种具有高灵敏性和选择性的半胱氨酸检测方法具有重要意义。

目前已报道的检测方法有几种，包括电化学分析、比色法和高效液相色谱法。但这些检测方法存在样品制备复杂、灵敏度不高、检测时间长等缺点。相比之下，荧光探针检测方法因其反应快、灵敏度高、选择性独特、操作简便而得到广泛应用。利用3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物为原料合成新型的半胱氨酸比率荧光探针，暂无相关报道。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针3-(3-((4-丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物，能满足使用需求。本发明所要解决的另一技术问题是提供3-(3-((4-丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物的制备方法。本发明还要解决一个技术问题是提供一种上述检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针的应用。

为实现解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

检测半胱氨酸的诺蒎酮基比率型荧光探针为3-(3-((4-丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物，其结构式为：

所述的3-(3-((4-丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物的制备方法，包括如下步骤：

1)3-乙酰基诺蒎酮与对羟基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮；

2)3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮与三氟化硼-乙醚进行络合反应，得到3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物；

3)3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物与丙烯酰氯进行酯化反应，得到3-(3-((4-丙烯酰氧基)苯基)丙烯酰基)诺蒎酮二氟化硼络合物；

具体反应式为：

步骤1)中，3-乙酰基诺蒎酮与对羟基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮，具体步骤如下：

(1)将10～20mmol 3-乙酰基诺蒎酮、5～10mmol三氧化二硼、10～20mmol对羟基苯甲醛和10～20mmol硼酸三丁酯依次加入100～200mL乙酸乙酯中，60～80℃下反应30～60min，然后滴加5～30μL正丁胺，继续反应15～20h。反应液冷却至60℃后加入0.4M盐酸调节溶液pH至中性搅拌30～60min；

(2)反应完成后，加入蒸馏水洗涤反应溶液。得到的有机溶液用无水硫酸钠干燥、过滤、蒸馏，得到3-(3-(4-羟苯基)丙烯酰基)诺蒎酮粗产物；