[发明专利]一种枣树砧木组培苗获得丛生苗的培养基以及枣树砧木组织培养的方法

说明书

本发明提供了一种抗枣疯病枣树砧木组培苗获得丛生苗的继代增殖培养基和一种枣树砧木组织培养的方法，属于植物组织培养技术领域；所述继代增殖培养基以MS为基础培养基，增加抗坏血酸，D‑泛酸钙，D‑生物素等有机成分，并调整了植物激素成分及各成分的浓度配比。采用本发明配制的培养基，能使组培苗在继代增殖培养后获得从基部增殖的丛生苗，极大提高了组培苗的微繁效率，解决了长期以来枣的组培快繁以分枝苗和茎段切段繁殖的低微繁效率的技术难题。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，尤其涉及一种枣树砧木组培苗获得丛生苗的培养基以及枣树砧木组织培养的方法。

背景技术

植物的组织培养是植物遗传工程的基础，也是实用性极强的高新技术。植物的组织培养在植物的品种改良、新种质创制、稀有物种和具有重要经济价值物种的保存及繁殖方面都具有重要的应用前景。

植物的组织培养第一个获得成功的是1934年White用离体的番茄根建立了一个活跃生长的无性系。到现在，植物的组织培养虽然已经走过了近百年的历程，获得组培成功的植物种类也在日益增多，但由于不同物种基因型及遗传背景的复杂性，至今研究者们还不能实现对所有植物的组织培养成功。即使已成功的物种，由于不同类型和不同品种其基因型的差异，其组培的难易和所需的培养基条件也存在较大差异。因此现有的组培技术都是对某个物种的特定类型或品种是适宜的，换一个品种或类型可能就是不适宜的或说不是最佳的。枣树属于多年生木本果树，起源于我国并且到目前我国仍是世界上栽培面积最大，占世界栽培面积的90％以上，其他国家多以庭院零星栽培，少数国家有小规模的商品化种植。枣树是无性繁殖果树，常规嫁接繁殖费时费工，工作效率低。组织培养可快速提供生长整齐一致、无病虫害的优质种苗，是实现无性繁殖作物快速育苗的有效途径。枣树的组织培养研究早在上世纪60年代就已经开始研究并获得了一些品种的组培成功，到现在虽已过去了半个多世纪，但由于枣不同品种间遗传背景的复杂性，仍有一些品种很难组培成功，即使已组培成功的品种，也主要是以茎段切段繁殖和增殖效率很低(增殖倍数小于3)的基部增殖方式进行继代增殖，很难获得增殖倍数大于3的丛生苗增殖，继代增殖效率低，组培成本高，严重阻碍了枣优良砧木品种工厂化试管育苗的进展，妨碍了优良品种在生产上的快速推广，也影响了现代生物技术育种方法在枣品种改良上的应用。因此，研究筛选枣组培苗在继代增殖阶段产生丛生苗，提高微繁效率，是枣优质苗木繁育的需要，也是枣现代生物技术育种加速育种进程的需要。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种枣树砧木组培中的继代增殖培养基，用以解决现有技术中抗枣疯病优系、酸枣优系等枣优良砧木品种在组织培养的过程中继代增殖效率低的问题。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种用于枣树砧木组培的继代增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，还包含如下浓度的组分：0.1～2.0mg/L BA、0.02～1.0mg/L TDZ、0.05～0.3mg/L IBA、0.1～2.0mg/L D-生物素、0.1～2.0mg/L D-泛酸钙、50～300mg/L抗坏血酸、25～35g/L蔗糖。

作为优选，用于枣树砧木组培的继代增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，还包含如下浓度的组分：0.5～1.5mg/L BA、0.1～0.8mg/L TDZ、0.1～0.2mg/L IBA、0.5～1.5mg/L D-生物素、0.5～1.5mg/L D-泛酸钙、100～200mg/L抗坏血酸、28～32g/L蔗糖。

本发明还提供了枣树砧木组织培养的方法，具体步骤如下：

1)以枣头枝的茎段为外植体；

2)将所述茎段消毒处理后，接种到芽启动培养基上培养25～30天获得无菌苗；

3)将步骤2)中获得的无菌苗，转接到上述的继代增殖培养基上进行继代增殖培养。