[发明专利]一种测定羟基酪醇含量及纯度的超高效液相色谱方法

权利要求书

1.一种测定羟基酪醇含量及纯度的超高效液相色谱方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)色谱条件：

选用十八烷基或辛烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以磷酸水溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱，采用二极管阵列检测器或紫外检测器；

(2)羟基酪醇的含量测定：

对照溶液：取羟基酪醇标准品或对照品适量，用溶剂稀释制成每1ml中约含羟基酪醇0.01～0.5mg的溶液；

供试品溶液：取羟基酪醇或含有羟基酪醇的样品适量，用适宜的样品处理方法处理，用溶剂稀释制成每1ml中约含羟基酪醇0.01～0.5mg的溶液；

取对照溶液及供试品溶液注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积计算供试品中羟基酪醇的含量；

(3)羟基酪醇的纯度测定：

供试品溶液：取羟基酪醇适量，用溶剂稀释制成每1ml中约含羟基酪醇0.3～1mg的溶液；

取供试品溶液注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积归一化法计算羟基酪醇的纯度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，色谱柱为十八烷基或辛烷基键合硅胶中的任意一种，包括但不限于2.1*100mm，1.6μm、2.1*100mm，1.7μm、2.1*50mm，1.7μm、2.0*100mm，1.9μm等规格。

3.根据权利要求1～2所述的方法，其特征在于，磷酸水溶液中磷酸的浓度为0.01％～0.1％(v/v)。

4.根据权利要求1～3所述的方法，其特征在于，梯度洗脱程序为0～6分钟，磷酸水溶液-乙腈的比例为95：5～80：20；6～12.5分钟，磷酸水溶液-乙腈的比例线性变化至75：25～65：35；12.5～16分钟，磷酸水溶液-乙腈的比例为75：25～65：35。

5.根据权利要求1～4所述的方法，其特征在于，流动相的流速为0.2～0.3ml/min。

6.根据权利要求1～5所述的方法，其特征在于，柱温为25～40℃。

7.根据权利要求1～6所述的方法，其特征在于，检测波长为200～280nm。

8.根据权利要求1～7所述的方法，其特征在于，进样体积1～2μl。

9.根据权利要求1～8所述的方法，其特征在于，溶剂为磷酸水溶液-乙腈，比例为95：5～65：35。