[发明专利]可作为益生元的金耳多糖ATP-L1及其制备方法和应用

说明书

可作为益生元的金耳多糖ATP‑L1及其制备方法和应用。所述益生元来源于金耳专利菌株CGMCC20271和毛韧革菌CGMCC19659通过工厂化三段式管理栽培出的金耳子实体经过水提醇沉、DEAE‑Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephacryl S‑400凝胶层析分离纯化而得，其分子量为7.6×10⁵Da，其单糖组成按摩尔比为甘露糖：木糖：葡萄糖醛酸：葡萄糖：半乳糖＝5：4.1：1.1：0.1：0.1。本发明申请人经实验研究发现将金耳子实体多糖对小鼠进行灌胃处理后，小鼠抗炎因子白细胞介素‑10（IL‑10）表达量增加，小鼠炎性因子白细胞介素‑6（IL‑6）和白细胞介素‑1β（IL‑1β）表达量降低，提高了机体免疫力；促进肠道益生菌乳酸杆菌属和拟杆菌属增殖，使肠道微生物厚壁菌门与拟杆菌门比例降低，具有改善肠道微生物群落结构，促进机体健康的作用。

技术领域

本发明涉及源自金耳的益生元物质及其制备和应用技术领域。

背景技术

金耳俗称脑耳、黄耳和黄木耳等，是一种珍稀食用和药用真菌。金耳作为“三耳”之首，较木耳和银耳的子实体大，口感更佳细腻柔和，色泽更加鲜艳（参见李曦,邓兰,周娅,仲伶俐,赵珊,雷欣宇,郑幸果.金耳、银耳与木耳的营养成分比较[J].食品研究与开发,2021,42(16):77-82.）。益生元是不被宿主消化吸收却能够选择性地促进体内有益菌的代谢和增殖，从而改善宿主健康的有机物质。肠道微生物是人体微生态系统的重要组成部分，参与机体对营养物质的吸收和消化，对人体代谢非常重要。食用菌多糖是一种极性大分子物质，能够促进肠道内有益微生物的增殖，促进短链脂肪酸等次生代谢物的产生，调节机体免疫平衡，增强抵抗力。金耳多糖作为一种生物活性物质能够通过增强患者的免疫防御系统，达到抑病抗病的效果（参见杨林雷,李荣春,曹瑶,李梦杰,罗祥英,沈真辉,陆青青.金耳及金耳多糖的药用保健功效及其机理研究进展[J].食药用菌,2021,29(03):176-182.）。然而与其它真菌多糖相比，目前对金耳子实体多糖作为益生元在改善肠道微生物促进人体健康方面还鲜有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种可作为益生元的金耳子实体多糖ATP-L1，并提供这种金耳子实体多糖ATP-L1的制备方法及其在制备益生元食品、保健品和饲料中的应用。

本发明采取的技术方案如下：

一种可作为益生元的金耳多糖ATP-L1，其分子量为7.6×10⁵Da，其单糖组成按摩尔比为甘露糖：木糖：葡萄糖醛酸：葡萄糖：半乳糖＝5：4.1：1.1：0.1：0.1。

所述可作为益生元的金耳多糖ATP-L1的益生元来源于保藏号为CGMCC No.20271的金耳菌菌株和保藏号为CGMCC No.19659的毛韧革菌菌株。

所述可作为益生元的金耳多糖ATP-L1的制备方法如下：

（1）将金耳子实体采用水提醇沉，制备得到纯度大于90%的金耳子实体粗多糖；

（2）用蒸馏水溶解步骤（1）得到的金耳子实体粗多糖，用氯仿与正戊醇按质量比5：1混合后对金耳子实体粗多糖溶液进行去蛋白处理；

（3）用DEAE-Sepharose TM Fast Flow阴离子柱对经步骤（2）去蛋白处理过的金耳子实体粗多糖进行层析，上样条件为50mg金耳子实体粗多糖溶于10mL蒸馏水，流速1mL/min，收集洗脱液；

（4）用AKTA explorer层析系统进行Sephacryl S-400凝胶层析，凝胶柱规格100cmx26mm；上样条件为，将步骤（3）收集的水洗脱多糖溶液进行浓缩和冷冻干燥，将100mg水洗脱多糖样品溶于10mL蒸馏水，流速为1mL/min，收集溶液进行浓缩和冷冻干燥后得到金耳子实体多糖ATP-L1。

本发明所述的金耳子实体多糖ATP-L1在肠道益生元制品制备中的应用。

所述肠道益生元制品为食品、保健品和饲料中的一种。