[发明专利]一种猕猴桃组织培养方法

说明书

本发明属于植物组织培养技术领域，本发明提供了一种猕猴桃组织培养方法。本发明采用光自养微繁殖技术，充分利用植物组织培养技术的快速性和环境工程调控的整体性，在培养过程中不使用糖作为植物碳源，而是采取供应CO₂诱导组培苗进行光合作用，解决了传统组培生根周期较长、效率较低的问题，同时降低了生产成本，供应CO₂使得组培苗进行光合自养改变了以前由蔗糖供能的异养培养方式，使得组培苗的生长处于接近于自然状态，更有利组培苗适应大田环境，几乎不需要移栽驯化时间。本发明解决了猕猴桃组培苗污染率高、生根难、生根周期长、光合能力弱和幼苗质量差的问题，推动猕猴桃种苗繁育工厂化生产。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种猕猴桃组织培养方法。

背景技术

猕猴桃(Actinidia Chinensis)是一种经济价值较高的木质藤本植物，其果实肉厚汁多，酸甜适度，营养丰富，以其维生素C特高的营养价值而成为当前水果中之珍品，已经成为当今世界的新兴栽培果树。

随着消费市场需求不断增加，我国猕猴桃产业已进入高速发展阶段，而高质高效的苗木繁育成为整个产业发展迫切需要突破的关键环节。传统的组织培养技术，可有效获得猕猴桃无性系种苗，但其生根效率较低、生根周期较长，且在生根过程中容易发生微生物污染，严重影响组培苗质量。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种猕猴桃组织培养方法，在生根培养过程中不使用糖作为植物碳源，而是采取供应CO₂促进组培苗进行光合作用，利于诱导根系快速发育，解决了猕猴桃组培苗生根过程容易发生微生物污染、生根周期长、生根率低的技术问题。

本发明提供了一种猕猴桃组织培养方法，包括以下步骤：

将猕猴桃组培苗接种于生根培养基，于培养容器中、光照条件下进行生根培养，得到猕猴桃幼苗；所述生根培养基中不含糖；所述生根培养的过程中在培养容器中通入CO₂。

优选的，所述通入CO₂包括：在所述生根培养的第3天开始通入CO₂；在所述生根培养的第3～7d，所述CO₂的流量为0.8～1.2L·min^-1；在所述生根培养的第8d开始，所述CO₂的流量为1.8～2.2L·min^-1；在培养第3d开始保持所述生根培养的环境中CO₂浓度为800～1200μmol·mol^-1。

优选的，所述CO₂的通入频率为每间隔15～30min通入1次，每次的通入时间为3～8min。

优选的，所述光照条件包括：在所述生根培养的第0～7d内，每天光照8h、黑暗16h，光照强度低于1000lx；在所述生根培养的第8d开始，每天光照14h、黑暗10h，光照强度为2500～3000lx。

优选的，所述猕猴桃组培苗的培育方法包括以下步骤：

1)将猕猴桃茎段置于外植体培养基进行外植体培养，至茎段萌发出腋芽且所述腋芽的长度＞2cm；

2)将所述腋芽移植到增殖培养基，进行增殖培养，得到猕猴桃组培苗。

优选的，所述外植体培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：MS4.43g/L、蔗糖30g/L、NAA0.2mg/L和琼脂6～7g/L。

优选的，所述外植体培养的光照强度为2500～3000lx；所述外植体培养的温度为22～26℃。

优选的，所述增殖培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：MS 4.43g/L、蔗糖30g/L、NAA0.1～0.6mg/L、6-BA0.1mg/L和琼脂6～7g/L。