[发明专利]一种易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法

说明书

本发明公开了一种易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法，包括以下步骤：(1)取易黄汤样品，加入有机溶剂加热回流，再加入增溶剂，滤过、浓缩得到供试品溶液；(2)制备对照样品溶液；(3)将供试品溶液和对照样品溶液点样于氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板，置于展开剂展开，晾干后置于紫外灯下检视，所述的展开剂为聚乙二醇‑甲苯‑石油醚‑乙酸乙酯。本发明采用薄层层析法以盐酸小檗碱作为易黄汤中盐黄柏有效成分来进行定性分析，采用吐温80增溶，同时结合体积比为1：7～16：4～12：1～4的聚乙二醇‑甲苯‑石油醚‑乙酸乙酯展开剂进行分离，斑点清晰度高且Rf在较优区间内、鉴别结果准确。

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法。

背景技术

易黄汤是一种主治肾虚湿热带下症的中药方剂，原料包括：山药、芡实、黄柏、车前子、白果。具体配方为山药(炒)、芡实(炒)各30g，黄柏(盐水炒)6g，车前子(酒炒)3g、白果(碎，十枚)12g。易黄汤的用法为用水煎服，主治肾虚湿热带下、带下粘稠量多、色黄如浓茶汁、其气腥秽、舌红、苔黄腻者。现代临床主要用于(1)宫颈糜烂；(2)慢性盆腔炎；(3)阴道炎等的治疗。

黄柏与盐黄柏属于同种药物，黄柏指生黄柏，盐黄柏是由生黄柏用盐炮制后制得，用盐炮制黄柏可以增加入肾的功效。黄柏性味苦寒，有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮之功效，作为传统中药在市场流通和临床治疗应用广泛。黄柏的主要有效成分为盐酸小柴碱和盐酸黄柏碱等生物碱类化合物，吴珊珊等人利用HPLC法同时测定不同等级黄柏饮片中多指标成分的含量，研究发现盐酸小檗碱含量5.5％，盐酸黄柏碱含量0.55％，即黄柏中的生物碱类化合物以盐酸小檗碱含量最多(吴珊珊,胡麟,龚晓猛,等.HPLC法同时测定不同等级黄柏饮片中多指标成分的含量[J].中国药房,2016,27(15):2135-2137.)。

目前关于黄柏的鉴别方法，《中国药典》2015版中是以醋酸甲醇溶液为溶解液，超声处理，并用三氯甲烷-甲醇-水(30：15：4)展开，稀碘化铋钾试液显色，但使用其方法鉴别时，因需另外喷显色剂，步骤繁琐；且用醋酸甲醇溶解时盐黄柏中的盐酸小檗碱可能会出现溶解度低从而导致斑点不清晰等问题。另外，在其他公开文献的报道中，该方法也会因为药材成分不同导致干扰严重、斑点不清晰的问题。

公开号为CN113252836A的中国专利文献公开了一种黄柏及黄柏酒炙品的薄层层析鉴别方法，包括如下步骤：(1)将样品制成提取液；(2)将步骤(1)所得提取液固液分离，向所得液体中加入溶剂，制备得到供试品溶液；(3)将步骤(2)所得供试品溶液与对照品溶液于硅胶板点样，展开，取出，干燥后于紫外灯下检视。该发明使用乙酸乙酯、甲醇、三氯甲烷、氨水和三乙胺按体积比为4-8：1-3：1-3：0.5-1.5：1组成的混合溶液作为展开剂，组分较为复杂。

公开号为CN103134895A的中国专利文献公开了一种复方黄柏制剂的鉴别方法，该复方黄柏制剂包括黄柏、虎杖、萹蓄、瞿麦、白茅根、野菊花、淫羊藿和车前子，利用薄层色谱鉴别其中的黄柏药材，溶解液选用甲醇，展开剂选用乙酸乙酯：无水乙醇：甲酸(6-8.5：0.5-1.5：1-2.5)，在365nm紫外光灯下检视出现黄色荧光斑点。但该发明中测试溶液的稳定性有待提高。

基于上述现有技术存在的缺陷，开发一种操作简单、易于显色、准确度高、适用于易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法至关重要。

发明内容

本发明提供了一种易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法，该方法适用性好、易于实施，且鉴定结果准确，不需要显色剂的作用，斑点清晰度高且Rf值在较优区间内，避免了假阳性和假阴性结果。

具体采用的技术方案如下：

一种易黄汤中盐黄柏有效成分的鉴别方法，包括以下步骤：

(1)取易黄汤样品，加入有机溶剂加热回流，再加入增溶剂，滤过得到滤液，浓缩后得到供试品溶液；