[发明专利]一种细胞计数方法

说明书

本发明公开了一种细胞计数方法，涉及细胞计数相关技术领域，包括A：取样管理、B：部署标本检测管理、C：执行管理、D：分类管理、E：液体样本浓度管理、F：不同温度变化下样本的流动性、G：针对待测液体流速不同的计数策略、H：得到并区分不同种类的细胞含量方法：包括检测温度、检测样本、检测设备、检测执行、核对数据和得出结果。本发明通过取出定量样本在不同温度下保存，保持细胞的活性不同，避免在对细胞计数时，细胞活性差在样本内堆积，且采用电阻脉冲计数时，流速快易造成对细胞统计不到位，降低实际中的细胞数量，在样本流动穿过微孔时，电极间的电阻发生瞬时变化，产生电脉冲，通过一个脉冲感应模块对细胞的数量统计。

技术领域

本发明涉及细胞计数相关技术领域，特别涉及一种细胞计数方法。

背景技术

干细胞治疗行业是新的产业热点，目前常用的干细胞有造血干细胞和间充质干细胞两种，其中造血干细胞属于白细胞的一种，可以用血细胞计数仪来准确测量其浓度，而间充质干细胞是一种贴壁细胞，需要贴壁生产，呈梭状，计数困难。

在中国发明专利申请号：CN201811552394.6中公开有一种基于骨架提取的细胞计数方法，该基于骨架提取的细胞计数方法，虽然，采用OTSU阈值分割、形态学操作对组织病理学图像进行预处理，具有图像分割效果好、计算量小、运行简单、运行效率高等优点，利用细胞二值图像的骨架化来对细胞进行计数，降低了组织病理学图像中组织细胞高度粘连对细胞计数的影响，获得的结果具有较好的准确性，方法具有较高的运行效率，但是，该基于骨架提取的细胞计数方法，需要人工操作稀释，在计数池加样，操作误差较大，重现性很差，计数结果不稳定，影响在干细胞中治疗使用。

因此，提出一种细胞计数方法来解决上述问题很有必要。

发明内容

（一）解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种细胞计数方法，解决了需要人工操作稀释，在计数池加样时操作误差较大，重现性很差、计数结果不稳定，影响在干细胞中治疗使用的问题。

（二）技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

一种细胞计数方法，包括以下步骤：

A：取样管理：对病人造血机构内血液样本，分割成多组体积相等的计数池；

B：部署标本检测管理：在样本体积和反应电压大小一样的情况下，对多组样本检测；

C：执行管理：在满足样本检测条件的情况下执行技术，改变液体穿过流速，并得出计数结果；

D：分类管理：根据脉冲波的数量，脉冲幅度的大小，区分不同种类的细胞的数量；

E：液体样本浓度管理：在对分类后的细胞统计，得出样本计数池内细胞总数，细胞浓度=电脉冲细胞数量/样本计数池体积。

F：不同温度变化下样本的流动性为：样本在不同温度下流动性不同，进而影响细胞的活性，检测中出现较大的误差值。

G：针对待测液体流速不同的计数策略为：微孔未设置阻断，使样本正常穿过微孔，测出一个电脉冲的总量为875；将微孔内阻断一半，改变样本穿过微孔的速度，测出一个电脉冲的总量为960；将微孔内阻断三分之二，减小样本穿过微孔的速度，测出一个电脉冲的总量为816。

H：得到并区分不同种类的细胞含量方法：包括检测温度、检测样本、检测设备、检测执行、核对数据和得出结果。

可选的，所述检测温度具体为：对样本储存时的温度调控，分别将多个样本的温度设置为50°、35°和20°，确定温度是否对细胞计数产生影响。

可选的，所述检测样本具体为：对于每个样本，进行详细观察核对，确保其中没有掺入变量物质。

可选的，所述检测设备具体为：电源接通是否稳定，微孔内电脉冲是否正常，确保设备内部整洁，避免其他物质混入样本，改变计数结果。