[发明专利]快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯敏感性的方法及其应用

说明书

本发明公开了一种快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯敏感性的方法及其应用，该方法首先建立草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯的相对敏感基线；然后根据草地贪夜蛾田间种群在诊断剂量下90min的死亡率判断其对该药剂的敏感性；再将草地贪夜蛾田间种群在诊断剂量下的死亡率与其对该药剂的LC₅₀值进行相关性分析。本发明操作简单，易于向农民推广；可以在田间使用，不需要在室内完成；节省时间，90min即可检测出草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯的敏感性；储存条件简单，货架期长。

技术领域

本发明涉及植物保护学农药学领域，具体涉及一种快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯敏感性的方法及其应用。

背景技术

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(Smith)属鳞翅目，夜蛾科，是一种非常重要的农业害虫。具有食性广、迁飞能力强、繁殖力高、危害严重等特点，是联合国粮农组织向全球预警的跨国界迁飞的重大害虫。2018年12月入侵我国云南，己经成为我国北迁南回、周年循环发生的重大害虫。化学防治是防控草地贪夜蛾的主要手段，但是由于我国地域辽阔，草地贪夜蛾在不同地区的发生情况不同，因此不同地区的用药品种、强度和频次也都存在差异，导致不同地区草地贪夜蛾种群对杀虫剂的抗性发展也不一致。

对草地贪夜蛾进行抗药性监测是有效开展有害生物综合治理(IPM)和杀虫剂抗性管理(IRM)的重要环节。当前，我国对草地贪夜蛾田间种群的生物测定主要是浸叶法和饲料药膜法，需要采集试虫带回实验室，人工饲养1-2代再用于生物测定，死亡率检测时间在24h以上，存在工作量大，实验周期长，检测时间长的特点。因此，快速准确检测草地贪夜蛾对杀虫剂的敏感程度，对合理使用杀虫剂和草地贪夜蛾的有效防治及延缓其抗药性的发展具有重要的指导作用。

高效氯氟氰菊酯是拟除虫菊酯类杀虫剂的代表性品种，作用于昆虫神经系统中的钠离子通道，具有较高的生物活性，2019年被农业农村部推荐用于草地贪夜蛾的应急防治。2019-2021年，甲氨基阿维菌素苯甲酸盐·高效氯氟氰菊酯、氯虫苯甲酰胺·高效氯氟氰菊酯和除虫脲·高效氯氟氰菊酯复配剂也被推荐用于草地贪夜蛾的应急防控。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯敏感性的方法及其应用，该方法可以在90min内快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯的敏感性，具有快速、准确、简便等优点，可以满足在田间快速检测草地贪夜蛾药剂敏感性，进而快速选择防治药剂的需求。测定方法基于Shotkoski等(1990)和Shufran等(1997)的玻璃管药膜法并加以改进。先使用玻璃管药膜法对草地贪夜蛾室内相对敏感品系进行生物测定，建立相对敏感基线。玻璃管药膜的制备方法如下：将杀虫剂原药用丙酮配制成10000mg/L的母液，按等比稀释成需要的浓度，吸取1mL药液加入到特定的玻璃瓶中，将玻璃管置于滚轴混匀仪上，使药剂均匀成膜。接入试虫后进行生物测定：挑选健康一致的草地贪夜蛾3龄初幼虫(24h)12头，设置3次重复，在接入草地贪夜蛾90min后观察试虫死亡情况，计算死亡率和LC₉₉值，检测草地贪夜蛾田间种群的敏感性。

为实现上述目的，本发明所设计一种快速检测草地贪夜蛾对高效氯氟氰菊酯敏感性的方法，包括以下步骤：

1)生物测定--玻璃管药膜法：

将高效氯氟氰菊酯溶液溶解于丙酮溶解，得到母液，再将母液用不同体积的丙酮进行梯度稀释，得到不同浓度梯度的药液；将不同浓度的药液分别置于玻璃瓶中，然后将玻璃瓶置于滚轴混匀仪上，待药液在瓶底和瓶壁上均匀成药膜后晾干，进行下一步敏感性测定：

取健康的草地贪夜蛾敏感品系3龄初幼虫，放置在培养箱培养，记录活虫数；计算药剂的校正死亡率，公式如下：

公式中，处理组死亡率为处理组死虫数/总虫数；

对照组死亡率为对照组死虫数/总虫数；

2)敏感基线建立：