[发明专利]一种自产氧型仿生光动力/铁死亡/免疫抑制微环境调节纳米平台及其制备和应用

说明书

本发明提供一种自产氧型仿生光动力/铁死亡/免疫抑制微环境调节纳米平台及其制备和应用。所述纳米平台由包载光敏剂二氢卟吩e6(Ce6)、产氧剂/铁死亡诱导剂血红素(Hemin)的牛血清白蛋白(BSA)的CH/BSA内核与连接PEP20多肽的M1极化巨噬细胞膜通过共挤出法构建而成。M1极化巨噬细胞膜赋予纳米平台肿瘤靶向能力和更高的稳定性，将Ce6、Hemin、PEP20高效递送至肿瘤部位，在660nm近红外光照射下，Ce6产生ROS，该PDT作用被Hemin的催化产氧性能增强；Hemin中的Fesupgt;3+/supgt;被还原为Fesupgt;2+/supgt;，促进脂质过氧化物(LPO)的产生，PDT也参与该过程；PEP20作为CD47‑SIRPα剂，具有免疫激活作用，刺激IFN‑γ的分泌，下调System‑Xc‑，减少谷胱甘肽(GSH)合成，增强铁死亡作用。三者协同作用，发挥更强的杀伤肿瘤效果。

技术领域

本发明属于药物制剂和生物医药技术领域，具体涉及一种自产氧型仿生光动力/铁死亡/免疫抑制微环境调节纳米平台及其制备和应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

光动力疗法(PDT)作为一种无创、有效且时空可控的抗癌方式，在肿瘤联合治疗中受到广泛关注。然而，要获得满意的PDT效果，仍然存在几个重要问题。首先，在肿瘤细胞中存在固有的和获得性的抗凋亡能力，增加了PDT治疗失败和治疗后复发的风险。因此，需要将其他细胞死亡模式与PDT相结合。其次，肿瘤微环境(TME)中的缺氧是TME的内在标志，阻碍了PDT的ROS产生。此外，缺氧还可能将肿瘤相关巨噬细胞从免疫增强型M1重新调节为免疫抑制M2型，从而促进肿瘤细胞的免疫逃逸。因此，在PDT期间缓解肿瘤缺氧至关重要。最后，虽然已报道PDT通过诱导免疫原性细胞死亡(ICD)来激活T细胞免疫，但效率远远不够，这可能归因于TME中存在多种免疫逃避机制。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明设计了一种新型纳米平台(MP@CH/BSA NP)，以牛血清白蛋白(BSA)作为二氢卟吩e6(Ce6，C)和血红素(Hemin， H)的载体，形成CH/BSA NP。PEP20(Mal-PLGLAG-AWSATWSNYWRH)通过MMP-2敏感肽序列(-PLGPAG-,L)被修饰到M1巨噬细胞膜上形成MP，最后用MP包覆CH/BSA NP形成MP@CH/BSA NP。Ce6在NIR照射下触发 MP@CH/BSA NP的溶酶体逃逸和Hemin释放，从而促进血红素诱导的铁死亡活化；在MP@CH/BSA NP的溶酶体逃逸过程中，突然释放的Fe²⁺加剧了细胞内 Fe²⁺过载并通过非经典模式激活铁死亡；Ce6介导的PDT消耗细胞内GSH并下调肿瘤细胞的System Xc-表达，这促成了铁死亡的经典激活。在免疫调节作用方面，MP@CH/BSA NP同时增强巨噬细胞和T细胞免疫，全面逆转免疫抑制 TME，从而消除原发性肿瘤，抑制肿瘤转移。在巨噬细胞免疫方面，本发明创新性地设计了用于CD47抑制肽(PEP20)递送的MMP2响应纳米囊泡，以实现 ICB的目的。此外，本发明首次揭示了PEP20可以通过刺激IFN-γ分泌和下调 System Xc-来使铁死亡敏感，桥接CD47-SIRPα阻断和铁死亡治疗，为肿瘤联合治疗提供更多可能性。

第一方面，本发明提供一种自产氧型仿生光动力/铁死亡/免疫抑制微环境调节纳米平台MP@CH/BSA，所述自产氧型仿生光动力/铁死亡/免疫抑制微环境调节纳米平台以牛血清白蛋白(BSA)作为二氢卟吩e6(Ce6，C)和血红素 (Hemin，H)的载体，PEP20通过MMP-2敏感肽序列(-PLGPAG-,L)被修饰到M1巨噬细胞膜上形成MP，以MP包覆纳米粒得到具有肿瘤蓄积能力的纳米平台。

所述PEP20为Mal-PLGLAG-AWSATWSNYWRH，其序列如SEQ NO.1所示。