[发明专利]一种猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂及其应用

说明书

本发明公开了一种猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂及其应用，属于医药技术领域。本发明的抑制剂K‑252a对丝氨酸苏氨酸蛋白激酶的酶活抑制率为66.3%，对丝氨酸苏氨酸蛋白激酶的酶活半抑制浓度为13.81μM，其能够显著抑制猪链球菌的生长，可用于制备抗菌药物。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂及其在制备抗菌药物中的应用。

背景技术

开发新型抗菌药物是应对当前严峻耐药性形势的重要手段，针对细菌关键调控蛋白开展抑制剂筛选将为新型抗菌化合物筛选提供重要基础。在多种革兰氏阳性菌厚壁门的细菌中存在一种具有重要调控作用真核样丝氨酸苏氨酸蛋白激酶STK。已经有研究表明STK是结核分枝杆菌、假结核耶尔森菌和金黄色葡萄球菌等病原菌的重要毒力和代谢调控蛋白。在猪链球菌中，STK参与细菌生长、分裂、碳代谢、生物被膜形成等重要生理过程。由于STK在病原菌生理和致病过程中发挥重要作用，其被认为是一种潜在的抗菌药物靶标。

猪链球菌STK包含胞外结构域、跨膜结构域和胞内催化结构域，在特定条件下STK被激活，使得胞内催化结构域发生自磷酸化，之后通过其激酶活性使其底物蛋白的丝氨酸/苏氨酸位点发生磷酸化，发挥调控作用。我们的前期研究表明，当STK的自磷酸化位点突变后，STK的功能受到显著影响，表明可以通过抑制STK的自磷酸化来抑制STK的功能。基于此，可利用基于STK自磷酸化酶活测定的方法筛选STK的抑制剂。

发明内容

本发明目的在于提供一种猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶STK的抑制剂，本发明的目的还在于提供所述的抑制剂在制备抗菌药物中的应用。

本发明所筛选的抑制剂能够抑制猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶STK的活性，并抑制猪链球菌的生长。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种猪链球菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶的抑制剂，其为结构式如下所示的化合物K-252a：

该化合物为(9S,10R,12R)-9,12-环氧-1H-二吲哚并[1,2,3-fg：3',2',1'-kl]吡咯并[3,Chemicalbook4-i][1,6]苯并重氮辛-10-羧酸,2,3,9,10,11,12-六氢-10-羟基-9-甲基-1-氧代甲酯，分子式为C₂₇H₂₁N₃O₅，分子量为467.47。

上述抑制剂在抗菌中的应用，所述的应用为非疾病治疗的目的。

上述抑制剂在制备抗菌药物中的应用。

所述的抗菌为抑制猪链球菌生长。

一种抗菌药物，包含上述抑制剂。

本发明的有益效果：本发明的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂对10μM STK的酶活抑制率为66.3％，其对STK的半抑制浓度为13.81μM，能够显著抑制猪链球菌的生长。

附图说明

图1：实施例1中的质粒构建模式图。其中图1(A)是pET28a载体图谱；图1(B)是STK表达质粒构建图。

图2：9种广谱激酶抑制剂staurosporine结构类似小分子对STK酶活的抑制作用。

图3：K-252a对STK酶活的半抑制浓度(IC₅₀)测量结果。K-252a对STK酶活的IC₅₀为13.81μM。

图4：K-252a对猪链球菌生的生长抑制作用。与对照相比，K-252a处理后猪链球菌SC19菌株生长受到明显抑制。

具体实施方式