[发明专利]一种低温促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发的方法和应用

说明书

本发明公开了一种低温促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发的方法和应用。是将丛枝菌根真菌菌丝或含菌丝的菌剂置于低温保藏，然后以此低温保藏的菌丝或从菌剂中分离出的菌丝进行萌发生长。本发明发现，低温保藏处理显著提高了丛枝菌根真菌菌丝的萌发率并显著促进了丛枝菌根真菌菌丝萌发管的长度，具有重大意义，是提高丛枝菌根真菌菌剂质量的重要措施。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种低温促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发的方法和应用。

背景技术

丛枝菌根真菌可以与80％陆地植物的根系建立共生关系，促进宿主植物对矿质养分，如磷和氮的吸收；提高农作物对生物和非生物胁迫的抗性，比如提高农作物对养分贫瘠、干旱、重金属毒害、酸碱度胁迫、病虫害等的耐受性，改善农作物的生长势，进而提高农作物的产量和品质。因此，丛枝菌根真菌在农业生产上具有很大的应用潜力。

丛枝菌根真菌与植物建立共生关系的过程中，孢子萌发，菌丝伸长并分支，植物根系释放分支因子独脚金内酯等物质引导丛枝菌根真菌菌丝朝着植物根系分支生长，同时丛枝菌根真菌也会释放菌根因子如脂壳寡糖，与植物之间进行信号交流。丛枝菌根真菌菌丝到达根系后会在表皮形成菌足，从菌足处侵入植物皮层细胞，在根细胞内形成丛枝、孢子和泡囊，之后继续向根外生长形成根外菌丝和孢子。丛枝菌根真菌菌剂中一般含有孢子、菌丝和侵染根段，它们都是丛枝菌根真菌的繁殖体。在丛枝菌根真菌与根系共生过程中，繁殖体萌发率的高低和萌发管的长度对共生关系的建立，及共生效率的高低和促生效应的大小具有决定作用，也是量化菌剂质量的重要指标。一般来说，菌剂中繁殖体的萌发率越高、萌发菌丝越长，则菌剂对农作物根系的侵染越好，对农作物生长的促进效应越大。因此，如何提高丛枝菌根真菌的繁殖体活力是其扩繁技术中的一个重要因素，也是有效提高菌剂质量的重要途径。

目前，对丛枝菌根真菌繁殖体的研究均集中在孢子上，通常情况下丛枝菌根真菌孢子的萌发率会随着培养时间的增加而降低。现有技术(申请号为201410205346.5)公开了一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发的方法，使用RiT-DNA转基因的胡萝卜毛状根分泌液，外加葡萄糖和适当氮源促进了Glomus intraradices孢子的萌发和萌发管的伸长。但是，该方法需要对毛状根的分泌物进行收集浓缩等，操作复杂，步骤繁琐。另一技术(申请号为202110393088.8)在培养基中添加一定浓度的硒元素促进孢子萌发和菌丝生长。操作相对简单，但是仍然需要额外添加硒酸钠。

现有的技术均是关于提高丛枝菌根真菌孢子萌发率的研究，菌丝是丛枝菌根真菌菌剂非常重要的繁殖体，目前还没有关于提高菌丝体活力和萌发率的技术。因此，研究一种操作简便，且能促进丛枝菌根真菌菌剂中菌丝体萌发的方法具有重大意义，是提高丛枝菌根真菌菌剂质量的重要措施。

发明内容

本发明的目的在于提供一种低温促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发的方法。

本发明的低温促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发的方法，其是将丛枝菌根真菌菌丝或含菌丝的菌剂置于低温保藏，然后以此低温保藏的菌丝或从菌剂中分离出的菌丝进行萌发生长。

优选，所述的低温是4℃。进一步优选，所述的保藏是4℃保藏不超过6个月，优选保藏3-6个月。

优选，所述的丛枝菌根真菌是异形根孢囊霉。进一步优选，所述的异形根孢囊霉是异形根孢囊霉DAOM197198。

本发明的第二个目的是低温保藏在促进丛枝菌根真菌菌剂质量中的应用。

优选，是低温保藏在促进丛枝菌根真菌菌丝体萌发和/或生长中的应用。

优选，所述的低温是4℃。进一步优选，所述的保藏是4℃保藏不超过6个月，优选保藏3-6个月。

优选，所述的生长是萌发管长度增加。

本发明具有以下有益效果：